半胱胺对断奶前后仔猪胃粘膜H-K-ATPase表达和活性的影响及其作用机制初探

摘要

本研究旨在探讨半胱胺对断奶前后仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase表达和活性的影响及其可能的作用机制。在日粮中添加半胱胺饲喂仔猪，采用相对定量RT-PCR方法测定断奶前后仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase的表达，同时测定其活性，以在整体水平观察半胱胺对仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase表达和活性的影响。在此基础上，用半胱胺处理培养的仔猪胃粘膜上皮细胞和壁细胞，测定SS的表达以及H+-K+-ATPase的表达和活性，以探讨半胱胺可能的作用机制。 1.半胱胺对断奶前后仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase表达和活性的影响　　选取新生仔猪18窝，随机分为实验组和对照组各9窝，自12日龄起，对照组饲喂基础乳猪料，实验组在基础饲料中添加半胱胺120mg/kg饲料，仔猪均于35日龄断奶。分别于断奶前1周、断奶当天、断奶后36h、72h、1周以及断奶后10d屠宰仔猪取胃底粘膜，每个时间点随机选取实验组和对照组仔猪各6头，用相对定量RT-PCR方法测定不同日龄仔猪胃粘膜中H+-K+-ATPasemRNA表达的相对含量，并同时测定H+-K+-ATPase的活性。 2.半胱胺的作用机制初探　　仔猪胃粘膜上皮细胞被分为四组，在含10﹪胎牛血清的DMEM高糖培养液中培养24h后，分别在新鲜的基础培养液中添加0(对照组)、0.001(低浓度组)、0.01(中浓度组)和0.1(高浓度组)mg/mL的半胱胺盐酸盐，继续培养20h后收集细胞，用相对定量RT-PCR法测定细胞H+-K+-ATPase和生长抑素(SS)mRNA的相对丰度，同时测定细胞H+-K+-ATPase活性。此外，分离壁细胞并培养24h后更换培养液，用与处理上皮细胞相同四种浓度的半胱胺盐酸盐处理壁细胞，继续培养20h后收集细胞，测定其H+-K+-ATPase的活性。

目录

文摘

英文文摘

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引言

第一篇文献综述

第一章胃酸分泌与H+-K+-ATPase

1壁细胞和H+-K+-ATPase

2胃酸分泌的机制

3胃酸分泌的调节

第二章仔猪胃酸分泌的调节

1仔猪胃酸分泌的发育模式

2胃泌素和SS对仔猪胃酸分泌的发育性调节

3影响仔猪胃酸分泌的因素

4提高仔猪胃内酸度的措施

第三章半胱胺的研究进展

1半胱胺的理化性质

2半胱胺的作用机理

3半胱胺的作用

第二部分试验研究

第一章半胱胺对断奶前后仔猪胃粘膜H+-K+-ATPase表达和活性的影响

1材料和方法

2结果

3讨论与小结

第二章半胱胺的作用机制初探

实验一半胱胺对仔猪胃粘膜上皮细胞SS表达及H+-K+-ATPase表达和活性的影响

实验二半胱胺对仔猪胃壁细胞H+-K+-ATPase活性的影响

3本章讨论与小结

全文结论

参考文献

致 谢

硕士期间文章发表情况

附 录：缓冲液配方