富硒麦芽对DEN诱发大鼠肝癌PCNA和血管生成影响的免疫组化研究

摘要

本实验以二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌为模型，观察不同浓度富硒麦芽对大鼠肝癌发生、发展的影响；着重应用免疫组化方法观察增殖细胞核抗原及肿瘤血管生成等方面的变化，以探讨富硒麦芽的抗癌机理。 实验Ⅰ.本实验观察富硒麦芽在化学致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌过程中，对肝癌发生、发展的影响。大鼠185只随机分为5组：Ⅰ组为正常对照组，25只；Ⅱ组为模型对照组，40只，分别在日粮中添加亚硒酸钠至硒含量为0.1mg·kg-1；Ⅲ-Ⅴ组为富硒麦芽组，每组40只，日粮中添加富硒麦芽使硒含量分别达0.3、1.0、3.0mg·kg-1；各组麦芽含量与Ⅴ组一致，不足部分以普通麦芽粉补足。各组日粮营养成分接近，均达美国NRC标准。Ⅱ-Ⅴ组以100mg·L-1的DEN溶液连续喂饮诱癌16周，然后改饮常水至18周末。动态观察各组大鼠的体重、病理形态学、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)的变化；18周末，处死各组所有大鼠，记录眼观可见的肝表面癌结节数、体重以及肝重，并计算肝/体重比和肝癌发生率。 实验Ⅱ本实验观察富硒麦芽对DEN诱发大鼠肝癌增殖细胞核抗原的抑制作用。实验动物分组同实验Ⅰ。在诱癌开始的第4、8、12、16及18周每组随机选取5只大鼠断头处死，利用免疫组织化学法分析4-16周肝组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及第18周PCNA指数(PI)。表明富硒麦芽能减少PCNA的表达，提示抑制癌增殖细胞核抗原的表达可能是富硒麦芽发挥其抗癌作用的细胞学基础之一。 实验Ⅲ.本实验观察富硒麦芽对DEN诱发大鼠肝癌血管生成的影响。实验动物分组同实验Ⅰ。18周末每组选取5只大鼠断头处死，利用免疫组织化学法分析大鼠肝肿瘤微血管密度（MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果显示，1.0和3.0mg·kg-1富硒麦芽组MVD及VEGF蛋白表达较模型对照组显著降低，VEGF表达与MVD呈显著正相关。表明富硒麦芽对肝肿瘤血管生成有明显的抑制作用，下调VEGF表达可能是其抑制肿瘤血管生成的主要机制之一。

目录

文摘

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第一章硒的生物学特性

1硒在动物体内的生物活性形式

2硒在机体内的分布与代谢

参考文献

第二章硒抗癌作用机理的研究

1抗氧化作用

2影响致癌物的代谢

3增强机体免疫功能

4抗增殖作用

5诱导肿瘤凋亡

6通过体内代谢产生具有化学预防或抑癌作用的硒化合物

7抗肿瘤血管生成

8硒对肝癌抑制作用的研究现状

参考文献

第三章硒的需求及富硒食品的现状

1硒的需求

2富硒食品的现状

参考文献

第四章富硒麦芽对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌发生过程的抑制作用

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

参考文献

第五章富硒麦芽对DEN诱发大鼠肝癌发生过程中增殖细胞核抗原表达的抑制作用

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

参考文献

第六章富硒麦芽对DEN诱发大鼠肝癌血管生成的影响

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

参考文献

全文结论

致谢

附图