4-芳基香豆素及3,4-二氢-4-芳基香豆素生物活性研究

摘要

4-芳基香豆素（4-arylcoumarins）是一类拥有新型生物活性的古老化合物。此类化合物的结构类似于异黄酮又被称作新黄酮，因此有的学者将其划分到黄酮类物质当中。化合物的结构与功能相关，4-芳基香豆素类物质多样的结构赋予了它们丰富的活性。自上世纪50年代发现4-芳基香豆素以来，许多具有抗菌、抗艾滋病病毒、抗肿瘤、抗原虫、抗氧化、抗炎等活性的4-芳基香豆素类衍生物不断被发现。本文研究了编号分别为a～r的12种3，4-二氢-4-芳基香豆素与6种4-芳基香豆素的抑菌活性、抗氧化活性和细胞毒性，并推断相关结构与功能的关系，旨在发掘具有候选药物先导分子作用的4-芳基香豆素类衍生物。主要的研究结果有以下三个方面:
　　 抑菌实验结果表明，4-芳基香豆素类衍生物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长具有中等强度抑制作用，杀菌活性相对较弱。它们对枯草芽孢杆菌的抑菌活性最强，效果较强的是n样品和h样品，对枯草芽孢杆菌的MIC（有明显抑菌效果的最低样品浓度）值分别为7.3μg.mL-1和14.4μg.mL-1;4-芳基香豆素衍生物对白色念珠菌抑制活性较强的是m样品与n样品，MIC分别是29μg.mL-1和58.5μg.mL-1;抑制金黄色葡萄球菌较好的是h和n样品，MIC均为39μg.mL-1;对大肠杆菌的抑菌效果最弱.
　　 体外抗氧化实验结果发现e、f、g、n、p样品对DPPH和ABTS·+自由基的清除活性强于抗坏血酸(Vc)，这些样品化学结构上的共同特点是A环上含有相邻的羟基。与Vc的活性相似，此类物质清除上述两种自由基是一个迅速的过程，反应可以在1 min内完成。在以硝普钠(SNP)为NO供体考察样品清除NO的能力，结果显示n样品和o样品具有强于Vc清除能力，它们的EC50值分别为63.8μmol.L-1和26.4μmol.L-1。o样品的清除能力强于白藜芦醇（EC50=54.6μmol.L-1）。推断3'-甲氧基-4'-羟基苯基这一基团可能与4-芳基香豆素清除NO的能力密切相关，因为含有这一基团的o、n、j，表现出了强于其它样品的活性.
　　 MTT法测试了芳基香豆素样品的体外细胞毒性。实验结果显示样品i、j、n、o、p、l、r对人胃癌细胞株(BGC-823)的生长具有抑制作用，浓度在31.25 mg.L-1时的抑制程度高于50％;其中n样品的抑制能力最强， IC50值为29.1±1.3μmol.L-1。芳基香豆素样品的体外细胞毒性均低于紫檀芪（IC50=7.3±0.8μmol.L-1）和白藜芦醇（IC50=17.1±1.3μmol.L-1）。以大蜡螟为实验动物，首次考察了芳基香豆素样品的毒性。结果显示样品在浓度范围为12.5～200μg·g-1时对大蜡螟的三龄幼虫几乎没有口服毒性，与对照相比10天内幼虫几乎没有死亡。添加样品后幼虫不会出现厌食效应，食物的平均消耗量正常，食物的消化率正常，幼虫的生长率也正常。芳基香豆素样品以最高注射50μg每头时注射体重为250 mg左右的大蜡螟老熟幼虫时毒性不明显，大蜡螟的死亡率为0，低于相同注射量的伞形香豆素和紫檀芪，实验样品（紫檀芪、伞形香豆素、芳基香豆素）在大蜡螟由幼虫变成成虫的过程上有一个明显延缓的现象，这一过程的时间大约会被延缓1天左右，具有推迟发育的样品有e、g、h、j、o、p、m、n、r。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1．4-芳基香豆素类物质的分布及生物活性

1．1 分布情况

1．2 4-芳基香豆素类物质具有的生物活性

2．香豆素类物质的毒性

3．研究目的与意义

参考文献

第二章 4-芳基香豆素及3，4-二氢-4-芳基香豆素的抑菌活性测定

1．材料方法

1．1 实验样品

1．2 实验菌株

1．3 试剂与仪器

1．4 实验方法

2．结果与分析

2．1 样品的抑菌圈情况

2．2 样品的MIC值与MBC值

2．3 样品的抑菌动力学

小结

参考文献

第三章 4-芳基香豆素及3，4-二氢-4-芳基香豆素的抗氧化活性

1．材料与方法

1．1 实验样品

1．2 试剂与仪器

1．3 实验方法

2．结果与分析

2．1 样品对自由基及NO的清除能力

2．2 清除自由基的动力学曲线

2．3 样品对SNP生成NO的抑制

小结

参考文献

第四章 4-芳基香豆素及3，4-二氢-4-芳基香豆素的细胞毒性和昆虫毒性

1．材料与方法

1．1 实验材料

1．2 试剂与仪器

1．3 大蜡螟的人工饲养

1．4 实验方法

2．结果与分析

2．1 样品对BGC-823细胞增殖的抑制

2．2 样品的注射毒性

2．3 样品的口服毒性

小结

参考文献

全文结论

本文创新之处

攻读硕士期间发表的论文及获得奖项

致谢