山东省鸽新城疫病毒分离鉴定与分子特征研究

摘要

鸽新城疫(Pigeon NewcastIe Disease)又称鸽瘟，是由鸽源新城病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。鸽新城疫病毒又称为鸽Ⅰ型副粘病毒(PigeonParamyxovirus typeⅠ，PPMV-Ⅰ)，与禽新城疫同属副粘病毒科，禽腮腺炎病毒属，只有1个血清型。许多学者认为鸽新城疫是由于鸡新城疫病毒在鸽群长期存在，适应了鸽体内环境，从而引起病毒变异的结果，因此鸽Ⅰ型副粘病毒为禽Ⅰ型副粘病毒(AvianParamyxovirus typeⅠ，APMV-Ⅰ)的变异株。由鸽Ⅰ型副粘病毒引起的鸽新城疫对不同年龄、品种的鸽都具有感染性，并且传播快，发病率高，给养鸽业造成了重大的经济损失，是养鸽业重点防控的疫病之一。
　　本研究对山东省20个养鸽场进行临床调查，了解鸽场养殖的基本情况、新城疫发生情况以及防控现状。在20个养鸽场中采集320份血样和320份肛拭子进行新城疫抗体检测和新城疫病原检测。结果显示，(1)血清抗体检测:新城疫抗体效价集中在1∶64以下，其中抗体效价为零的样本就占18.75％，抗体效价为1∶256的样本占19.69％，新城疫抗体平均效价为3.65 log2，表明被调查的鸽场新城疫总体抗体效价不高。(2)病毒分离鉴定:将检测为新城疫阳性的肛拭子处理后接种9-11日龄SPF鸡胚进行病毒分离，获得4株PPMV-Ⅰ毒株。通过蚀斑纯化，将每株病毒挑取5-6个克隆进行F基因和HN基因测序，结果显示该4株PPMV-Ⅰ毒株属于同一型毒株。F基因裂解位点为112KRQKRF117，与强毒株裂解位点相一致。通过F基因和HN基因系统进化树分析发现，该4株PPMV-Ⅰ毒株属于classⅡ基因Ⅵb型。对4株PPMV-Ⅰ毒株的致病指数进行测定，其MDT值分别为62.4 h、66.1 h、84.2 h、63.3 h,ICPI值分别为1.34、1.42、0.97、1.36，表明均属于中等毒力株。该结果对该病防控具有重要指导意义。

目录

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摘要

英文缩略词表

第一章 鸽新城疫研究进展

1 概况

2 病毒分子生物学研究进展

2．1 病毒分类地位和形态

2．2 基因组及编码蛋白的生物学特性

2．3 鸽源禽Ⅰ型副粘病毒的毒力特征

3、诊断

3．1 血清学诊断

3．2 分子生物技术

4．防治

5．展望

参考文献

第二章 山东省鸽新城疫病毒分离鉴定与分子特征研究

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2．结果

2．1 血清抗体检测结果

2．2 病毒分离鉴定

2．3 分离株的蚀斑纯化

2．4 RT-PCR电泳结果

2．5 基因测序分析

2．6 4株分离株的毒力测定

3 讨论

3．1 被调查鸽场免疫效果不理想的原因

3．2 鸽新城疫流行的原因

3．3 PPMV-Ⅰ的F和HN基因结构分析

3．4 PPMV-Ⅰ毒力分析

参考文献

全文总结

致谢