拮抗触液核内P物质对吗啡戒断大鼠行为学的影响

摘要

目的:观察P物质在大鼠触液核内的表达及拮抗触液核内P物质对吗啡戒断的行为学影响,探讨触液核P物质在吗啡戒断中的作用。
　　 方法:本实验分二部分。
　　 第一部分,观察正常大鼠触液核内P物质的表达。
　　 雄性SD大鼠(SPF级,250-290g),1％戊巴比妥钠(40 mg.kg-1)腹腔注射麻醉成功后立体定位(Brega:-1.2 mm±0.4mm,Deep:3.2 mm±0.4 mm,Right tomedian sagittalp lane:1.4 rain±0.2mm)[10]左侧侧脑室注射CB-HRP3μl(0.3mg/ml)进行追踪标记触液核,48小时后灌注取材后固定;免疫荧光双标并在激光共聚焦显微镜下观察SP,CB-HRP/SP的表达。
　　 第二部分:观察拮抗触液核内P物质对吗啡戒断的行为学影响。
　　 雄性SD大鼠(SPF级,250-290g)78只随机分为三组,每组26只,建立吗啡戒断模型;在吗啡戒断模型的第四天上午,立体定位仪下左侧侧脑室注射CB-HRP3μ(0.3mg/ml)进行追踪标记dCSF-CN;第五天上午在立体定位仪下分别向触液核微量注射P物质拮抗剂[(D-Pro2,D-Phe7,D-Trp9)-P物质]及人工脑脊液2ul;第六天上午腹腔注射纳洛酮5 min后开始观测戒断表现并进行评分,时间为1h;后灌注取材后固定,免疫荧光双标并在激光共聚焦显微镜下观察戒断组、拮抗组及人工脑脊液对照组大鼠触液核内CB-HRP、SP及CB-HRP/SP的表达。
　　 结果:分为两部分
　　 第一部分:正常大鼠触液核内P物质的表达
　　 在激光共聚焦显微镜下可见到CB-HRP,SP和CB-HRP/SP三种标记细胞。其中红色荧光标记的CB-HR细胞即远位触液神经元细胞,红色荧光主要存在于胞体和突起,细胞核不显色,呈圆型或椭圆型,大部分为多极细胞,主要集中在触液核所在部位,部分胞体位于脑实质而突起伸入脑脊液。细胞计数为:26.2+4.5;P物质呈绿色荧光,正常大鼠触液核内有少量P物质表达,细胞计数为:26.2+4.5;CB-HRP/SP双标细胞呈黄色荧光,细胞计数为:26.2±4.5。
　　 第二部分观察拮抗触液核内P物质对吗啡戒断的行为学影响。
　　 2.1行为学观察实验大鼠的戒断症状并评分。
　　 戒断组的戒断总评分为:65.2±7.52,人工脑脊液对照组戒断总评分为:60.65±11.77,拮抗组戒断总评分为:26.2±8.07;拮抗组大鼠戒断症状总评分较戒断组明显降低(P＜0.05),拮抗组戒断症状较对照组有明显差别(P＜0.05),人工脑脊液对照组戒断症状总评分与戒断组无明显差别(P＞0.05)。
　　 2.2各实验组触液核内P物质的表达
　　 在激光共聚焦显微镜下可见到CB-HRP,SP和CB-HRP/SP三种标记细胞。其中CB-HRP细胞即远位触液神经元细胞,呈红色荧光。细胞计数戒断组CB-HRP细胞为26.8±9.9,人工脑脊液组为23.7±6.7,拮抗组为23.6±6.7,吗啡戒断组,P物质拮抗组及人工脑脊液组远位触液神经元细胞所处的位置,形态,大小,数量等与正常组未见明显区别:P物质呈绿色荧光,纳络酮激发戒断反应SD大鼠触液核内P物质高度表达细胞计数约为68.7±9.6,人工脑脊液组可观察到触液核内P物质表达显著增加约为58.7±12.8;拮抗组触液核内未见P物质表达。CB-HRP/SP双标细胞呈黄色荧光,细胞计数CB-HRP/SP啡戒断组为26.8±9.9,人工脑脊液组23.7±6.7,拮抗组未见双标细胞。
　　 结论:正常大鼠触液核内可见少量P物质表达:吗啡戒断组吗啡戒断行为学评分增高,P物质表达显著增加;拮抗触液核内P物质可减轻吗啡戒断症状。提示触液核P物质可能参与吗啡戒断的形成。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

前言

第一部分 触液核内P物质在正常大鼠的表达

材料和方法

结果

第二部分 触液核内P物质对吗啡戒断行为学的影响

材料与方法

结果

讨论

结论

论文图表

参考文献

英文论文

综述:P物质和吗啡耐受戒断

临床培训小结

攻读硕士学位期间完成的学术论文和综述

致谢