SDF-1a/CXCR4在发育大鼠海马和低氧缺糖海马脑片中的表达

摘要

目的：目前，SDF-1α/CXCR4生物轴在多种生物学效应中的重要作用备受瞩目。SDF-1α作为一种化学趋化剂和信号，可通过与其受体CXCR4结合发挥调节胚胎神经元发育的作用。SDF-1α/CXCR4信号通路对中枢神经系统的发育和在缺血性脑损伤后干细胞“归巢”起重要的作用，为更好的了解SDF-1α/CXCR4在中枢神经系统发育及缺血性脑损伤中的作用，我们研究了发育大鼠海马及海马脑片低氧缺糖培养后神经元SDF-1α/CXCR4的表达分布情况。
　　 方法：根据鼠龄将清洁级SD大鼠分为9组，即生后4天组，1、2、3、4、5、6、7周组和3月龄组，每组9只，雌雄不拘，同等条件喂养。用免疫组化染色观察海马各区的神经元SDF-1α和CXCR4表达的空间分布情况：并用免疫印迹方法检测大鼠不同发育阶段SDF-1α和CXCR4在海马CA区和DG区的表达规律。取新生6-9天SD大鼠36只，雌雄不拘，运用海马脑片培养技术随机分为正常对照组和低氧缺糖组(OGD)两组，利用PI荧光显色来观察海马脑片各区损伤情况，尼氏染色观察神经元形态，免疫组织化学染色观察SDF-1α和CXCR4在海马脑片神经元的表达情况，免疫印迹检测OGD前后SDF-1α和CXCR4的变化，从而研究SDF-1α/CXCR4轴与缺血性脑损伤之间的关系。
　　 结果：1.SDF-1α和CXCR4在发育海马各区表达：(1)免疫印迹检测显示，生后各时间点分别在分子量为11KD、43KD处检测到SDF-1α和CXCR4阳性条带。CXCR4在CA区和DG区的相对表达量均于生后1周到达高峰(P＜0.05），随后随年龄增长而逐渐下降；至生后3周，CA区CXCR4蛋白表达降至成年水平，而DG区于生后4周降至成年水平；SDF-1α在海马CA区及DG区的表达量差异无统计学意义。(2)免疫组化结果显示：从生后4天至成年，大鼠海马CA区和DG区可见CXCR4蛋白表达阳性的细胞，其胞浆呈棕黄色。生后早期，CA区锥体细胞伸出的轴丘上有棕黄色显色，后期其长轴突及短树突上也有不同程度CXCR4蛋白表达；DG区CXCR4阳性细胞主要表达于齿状回颗粒细胞下层。SDF-1α阳性细胞呈棕黄色着色，散在分布于CA区锥体层细胞内和DG区颗粒细胞层内。
　　 2．SDF-1α和CXCR4在培养海马脑片OGD损伤前后的表达：培养海马脑片OGD损伤前后均有SDF-1α和CXCR4的蛋白表达，免疫印迹结果显示，SDF-1于OGD后表达量明显增高，差异有统计学意义(P＜0.05),CXCR4蛋白表达则无统计学差异(P＞0.05)。
　　 结论：SDF-1α和CXCR4在生后不同发育阶段大鼠海马CA区和DG区均有表达，且其表达具有时间分布差异，提示SDF-1α/CXCR4轴与生后海马结构的发育及其功能密切相关。OGD后SDF-1α的表达升高，而CXCR4的表达相对稳定，两者表达模式的差异提示SDF-1α/CXCR4轴可能在低氧缺糖损伤过程中发挥一定作用。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

前言

第一部分SDF-1α/CXCR4在大鼠海马各区发育过程中的表达变化

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

论文图片

第二部分SDF-1α/CXCR4在海马脑片低氧缺糖性损伤中的表达

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

论文图片

参考文献

趋化因子SDF-1及其受体CXCR4研究现况 综述

参考文献

攻读硕士学位期间发表学术论文

致谢