改良的新生大鼠海马脑片缺氧缺糖模型的制备方法

摘要

目的：介绍一种经济实用的海马脑片缺氧缺糖模型的制备方法。方法：选出生8～10d的SD乳鼠，分离大脑海马．切成400μm厚的脑片，转至带有Millicel微孔膜插件的培养皿中。分别培养7d、14d、20d和30d，倒置显微镜观察形态。碘化丙啶（Propidiumiodide，PI）染色后荧光显微镜下检测脑片活力。充入氮气于不同时相点观察脑片缺氧状况。结果：①培养7d和14d的脑片中所有细胞PI染色呈阴性，培养30d时脑片中部分神经元PI染色阳性，细胞变性坏死。②充入氮气时间越长．海马脑片的死亡细胞越多。⑧充入氮气1．5h后正常培养24h可观察到海马脑片CA1、CA3、DG均出现强荧光显色。结论：脑片存活时间约30d．充入氮气1．5h可建立稳定的缺氧缺糖模型。