姜黄素抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖相关作用机制研究

摘要

目的：通过观察姜黄素对体外培养人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制及诱导凋亡作用，初步探讨姜黄素抑制宫颈癌细胞生长的可能机制，为姜黄素临床治疗宫颈癌提供实验和理论依据。
　　方法：人宫颈癌细胞株HeLa细胞常规培养于含10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM培养液中，在37℃、5％CO2及饱和湿度培养箱中培养。MTT法检测不同浓度(0、10、20、30、40、50μmol/L)姜黄素处理12、24、48h后对HeLa细胞的抑制率;倒置显微镜技术观察细胞形态;选取姜黄素作用24h的Hela细胞进行后续试验;RT-PCR检测PTENmRNA以及p53mRNA表达;Western blot法检测PTEN、p53、AKT蛋白表达。
　　结果：(1)MTT实验显示姜黄素对宫颈癌HeLa细胞的生长具有明显抑制作用，且呈剂量依赖性（r=0.847，P＜0.05）和时间依赖性(r=0.516,P＜0.05)。(2)倒置显微镜下观察可见，对照组细胞生长状态良好，随着药物浓度的增加，实验组细胞形态逐渐变圆、胞质回缩加剧、漂浮细胞逐渐增多。(3) RT-PCR结果显示姜黄素作用24h后的Hela细胞中，随着姜黄素浓度的增加，PTENmRNA的表达增加，p53mRNA的表达增加，对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05），试验组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05); p53mRNA与PTENmRNA的表达有着显著正相关(r=0.920，P＜0.01)。(4) Western blot法显示姜黄素作用24h后的Hela细胞中，随着姜黄素浓度的增加，PTEN蛋白表达增多，p53蛋白的表达增多，AKT蛋白表达减少表达，与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05），实验组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05); PTEN与p53的蛋白表达呈显著正相关(r=0.993，P＜0.01);PTEN与AKT的蛋白表达呈显著负相关(r=-0.978，P＜0.01)。
　　结论：姜黄素能抑制体外培养的人富颈癌HeLa细胞增殖，这种抑制作用在一定范围内具有剂量、时间依赖性;姜黄素能诱导体外培养的人宫颈癌HeLa细胞凋亡;姜黄素对HeLa细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与上调p53的表达，激活通路PTEN/PI3K/AKT通路相关。

目录

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缩略词表

摘要

前言

材料和方法

1 材料

2 方法

结果

讨论

结论

参考文献

姜黄素的药理作用及临床应用 综述

攻读硕士学位期间发表学术论文

临床培训小结

致谢

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