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超氧自由基(O)在小鼠骨髓细胞离体增殖中的作用

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目录

论文说明:指导小组

摘要

第一部分研究背景

第二部分“时间”和“剂量”的选定

第三部分O2-含量的测定

第四部分O2清除剂SOD对小鼠骨髓细胞增殖效应的影响

第五部分PMA对小鼠骨髓细胞增殖效应的影响

第六部分讨论

第七部分结论

参考文献

致谢

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摘要

本文用3H-TdR掺入法观察小鼠骨髓细胞离体培养条件下的增殖能力;用细胞色素C还原法测量细胞在增殖中产生的O2-的量;向离体增殖的骨髓细胞中加入不同浓度的O2清除剂——SOD,以不同程度的清除O2-,观察小鼠骨髓细胞离体增殖的情况。通过上述系列试验,最终判断O2-在小鼠骨髓细胞离体增殖以及低水平照射所致刺激效应中的作用。  研究取小鼠股骨骨髓细胞置1640培养液(内含3H-TdR)中,37℃水浴培养,每隔一定时间取三个平行样管,用Beckman液闪仪测其CPM值,以确定正常小鼠骨髓细胞离体增殖的最佳培养时间。  用不同剂量低水平γ射线,照射离体培养的小鼠骨髓细胞,照射完毕在37℃水浴箱中培养,以正常小鼠骨髓细胞离体增殖最佳时间为低水平γ射线照射的骨髓细胞培养终止时间,用3H-TdR掺入法,测得引起最大刺激增殖效应的最佳辐照剂量值。用细胞色素C还原法测量骨髓细胞在不同培养条件下的O2产生量,即在2ml无色1640培养液中(含1×106细胞/ml)加入160uM细胞色素C0.1ml,550nm处测其吸收值。再在细胞中加入不同量的SOD,用上述细胞色素C还原法直接测量细胞培养3小时以及受6cGy照射后培养3小时的O2-的产生量以及用3H-TdR掺入法测量它们的CPM值。  结论为以上实验综合说明O2-在生理范围内的增加是小鼠骨髓细胞增殖以及低水平照射刺激效应的十分重要的因素。

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