桑椹致腐微生物的分离鉴定及保鲜方法

摘要

桑椹是桑科植物桑（Morus alba L.）的果实，是一种传统的保健果品。桑椹营养价值丰富，富含多种维生素、矿物质、氨基酸及功能活性物质，具有增强人体免疫力，促进造血功能，降血糖，抗衰老等功效。但桑椹柔软多汁，表皮极薄，易腐烂，且成熟期极短，给桑椹的贮藏、运输和销售带来了极大的困难。此外，被微生物侵染的桑椹还可能导致食源性疾病，极大地降低了桑椹的食用价值。目前，国内外水果保鲜的方法主要采用化学保鲜和物理保鲜，化学药剂容易导致药物残留危害健康，物理保鲜成本昂贵，不利于大规模推广。为探讨桑椹保鲜的有效方法，本论文研究了导致桑椹致腐的主要微生物，桑椹低温冷藏保鲜及1-MCP和ClO2结合的气体保鲜方法，以其为桑椹保鲜技术的应用提供理论依据。取得如下研究结果：
　　1.桑椹致腐菌的分离鉴定。分别采用含纤维素和果胶的筛选培养基，从霉变的桑椹表面筛选出数株致腐菌。采用DNS法和考马斯亮蓝法，测定所筛选出的致腐菌的半乳糖醛酸酶和纤维素酶的比活力，依据两种酶比活力的大小，确定所选菌株GA和GE为主要致腐菌。结合形态学观察和18SrRNA基因的分子鉴定，最终确定 GA为核盘菌属(Sclerotinia Sclerotiorum)，GenBank登录号为KJ522780；GE为链格孢属(Alternaria sp.)， GenBank登录号为KJ489375。这两种致腐菌适宜生长温度都介于25至30℃之间。
　　2.桑椹致腐拮抗菌的分离与鉴定。以完好健康的桑椹为材料，采用浓度梯度稀释法，分离纯化出数株酵母菌。通过与上述分离的核盘菌属和链格孢属菌株共培养试验，筛选到一株对两种致腐菌具有抗性的红色酵母菌Y1。形态观察及保守基因5.8SrRNA基因分子鉴定表明，所分离的红色酵母菌Y1为锁掷酵母属（Sporidiobolus pararoseus），GenBank登录号为KJ569246。该酵母菌适宜生长温度在30℃左右。
　　3.低温冷藏对桑椹保鲜的影响。比较了在低温（3℃）和室温（25℃）条件下，桑椹感官及生理品质的变化。结果显示，桑椹在室温下存放二天，果柄褐变萎蔫，果实松软，气味较淡，有酸腐味；至第四天已全部霉变，无任何食用价值。低温下保存一周，果实色泽仍保持鲜红有光泽，果实口感无明显变化，果柄仍为青绿色。低温环境下，桑椹可溶性总糖、维生素 C、可滴定酸的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性等都维持在较高的水平，丙二醛含量较低，说明低温能有效延缓果实的呼吸作用，维持果实的品质。
　　4.1-MCP和ClO2结合处理对桑椹保鲜的影响。研究结果表明，1 g/m3的1-MCP单独处理能显著延缓果实衰老和感官品质，20 g/m3以下的ClO2单独处理对桑椹具有一定的保鲜效果。为筛选1-MCP和ClO2结合处理的最优保鲜条件，试验设计了1-MCP和ClO2的复合处理组合。结果显示，1 g/m31-MCP结合12 g/m3 ClO2处理的桑椹果实霉变率最低，至第三天，果实仍饱满鲜亮，果柄鲜绿，而对照组在第二天几乎全部霉变、无食用价值；生理品质研究表明，1-MCP和ClO2复合处理能有效地维持桑椹中Vc、可滴定酸、可溶性总糖等营养物质的含量，并延缓丙二醛（MDA）含量的积累。与对照组比较，1-MCP和ClO2复合处理能延长桑椹货架期3d左右。

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第1章 绪 论

1.1 前言

1.3保鲜原理

1.4 国内外果蔬保鲜技术及发展趋势

1.5 桑椹保鲜研究现状

1.6 本研究的目的和意义

第2章 桑椹主要致腐菌的筛选与鉴定

2.1 前言

2.2材料和方法

2.3 结果与分析

2.4讨论

2.5本章小结

第3章 抑制桑椹致腐的拮抗酵母菌的分离与鉴定

3.1 前言

3.2材料和方法

3.3结果

3. 4讨论

3.5本章小结

第4章 低温冷藏对桑椹保鲜的影响

4.1 前言

4.2试验材料

4.3 试验方法

4.4 结果

4.5 讨论

4.6本章小结

第5章 1-MCP 结合 ClO2处理对延长桑椹货架期及其生理品质的影响

5.1 前言

5.2 试验材料和方法

5.3 结果与分析

5.4讨论

5.5本章小结

结论

参考文献

本研究受资助的项目

攻读学位期间取得的成果

致谢