4EDB-1对LPS诱导的脓毒症小鼠生存保护及抗炎作用研究

摘要

目的：
　　研究4EDB-1（青藤碱衍生物）对脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）诱导的脓毒症小鼠生存及肝、肾功能的影响，并探讨其相关的抗炎作用机制。
　　方法：
　　1.4EDB-1对小鼠生存及肝、肾功能影响的观察
　　（1）观察并记录6天内不同药物浓度作用下，小鼠的存活状况。
　　（2）应用生化仪检测不同药物浓度、给药次数下，小鼠肝、肾功能指标谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（Aspartate transaminase， AST）、血尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）及血肌酐值（Creatinine，CREA）的变化。
　　2.4EDB-1对炎症因子变化及脾脏巨噬细胞表型的观察
　　（1）应用酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunodeficient Assay，ELISA）检测小鼠血清及细胞上清液中细胞因子如白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、白介素-10（Interleukin-10，IL-10）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平的变化。
　　（2）流式细胞仪检测小鼠脾脏细胞F4/80+CD206，评估巨噬细胞极化。
　　结果：
　　1.不治疗组（LPS+NS组）小鼠6天存活率为20%；4EDB-1实验组（5mg/kg、10mg/kg）小鼠存活率均为100%；SIN-HCL（盐酸青藤碱）实验组（10mg/kg、15mg/kg）存活率为80%，5mg/kg浓度治疗下，SIN-HCL实验组存活率仅为60%。2.与对照组及SIN-HCL组相比，不同浓度4EDB-1给药2次或4次后，小鼠相关肝、肾功能指标ALT、AST、CREA及BUN没有差异（均P>0.05）。
　　3.体内实验表明，与不治疗组相比，4EDB-1实验组（5mg/kg）小鼠血清中炎症因子IL-6及TNF-α水平均下降（P<0.001），IL-10水平明显升高（P<0.001）；体外实验表明，当4EDB-1浓度为1、2、5、10 umol/L时，细胞上清液中IL-6水平，较不治疗组，均明显下降（P<0.01，P<0.05），当4EDB-1浓度为2、5、10umol/L时，TNF-α水平明显下降（P<0.05，P<0.01），IL-10水平呈升高趋势（P<0.01）。4.4EDB-1（5mg/kg）作用脓毒症小鼠后，CD206的表达较不治疗组明显升高（P<0.01）。
　　结论：
　　1.与盐酸青藤碱（SIN-HCL）相比较，在相同治疗浓度下，4EDB-1对脂多糖（LPS）诱导的脓毒症小鼠具有更好的治疗作用，更能提高其存活率。
　　2.在肝、肾功能的相关试验中，发现青藤碱衍生物4EDB-1在短期内对小鼠肝、肾功能没有明显的毒性作用。
　　3.4EDB-1可能通过促进巨噬细胞向M2型极化，抑制IL-6及TNF-α的释放，促进IL-10的释放，从而减轻炎症反应，发挥对小鼠的保护作用。

目录

声明

常用缩略词对照表

第一章 绪 论

1.脓毒症概述

2.青藤碱简介及其在脓毒症中的研究现状

3.研究目的、研究内容

第二章 4EDB-1治疗后小鼠生存状况及其肝肾毒性作用的研究

1. 材料

2. 方法

3. 结果

4. 讨论

5. 存在的不足

第三章 4EDB-1对脓毒症小鼠抗炎作用机制的研究

1. 材料

2. 方法

3. 结果

4. 讨论

5. 存在的不足

第四章 主要结论

参考文献

综述:脓毒症相关研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文