黄精中三萜皂苷和活性多糖的分离与鉴定

摘要

黄精(PolygonatumsibiricumRed.)在我国分布广泛，资源丰富，是一种具有很大开发潜力的食疗中药。本文以黄精为研究对象，探索其皂苷和多糖的组成及其所具有的生物活性，为进一步开发利用奠定基础。 称取25kg黄精，粉碎后用70％乙醇，料液比1:7，回流提取2h，滤出液体，重复3次，滤液合并浓缩得乙醇提取物。将乙醇提取物依次使用石油醚和正丁醇进行萃取，所得正丁醇提取物通过AB-8大孔吸附树脂柱，依次用水、20％～95％乙醇进行梯度洗脱，流出液采用薄层层析法检测后分为九个部分。选取C、D、E部分反复使用ODS柱和MCI柱层析法，乙醇梯度洗脱，薄层层析法检测，从中分离得到两种化合物。 通过核磁共振法鉴定出这两个化合物的结构分别为2β,3β(OH)2-(28→1)葡萄糖-(6→1)葡萄糖-(4→1)鼠李糖-乌苏酸(积雪草苷)和2β，3β，6β(OH)3-(28→1)葡萄糖-(6→1)葡萄糖-(4→1)鼠李糖-乌苏酸(羟基积雪草苷)。这两种化合物在黄精中均未见报道。 滤渣加6倍量水微沸提取两次，每次3小时，过滤，合并浓缩滤液，用95％7,醇沉淀，重复3次，收集沉淀，用无水乙醇反复洗涤，得黄精多糖粗品。对黄精多糖进行了降血糖活性的研究，结果表明黄精多糖对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有明显的降血糖作用。 黄精多糖通过AB-8大孔吸附树脂柱，依次用水和75％乙醇洗脱，流出液采用薄层层析法检测后分为A、B和C三个部分。选取A部分继续采用DEAE-纤维素柱分离，并依次用水和O.1mol·L-1NaCl溶液洗脱，薄层层析法检测分为三个部分。其中后两个部分分别用SephadexG-100柱和HW-40柱层析法分离，并用水洗脱，薄层层析法检测，得到一种较纯的多糖。结合气相色谱法对其单糖组成进行分析，并运用核磁共振法对其结构进一步分析，可推测该化合物的结构为以β-1，2相连的酮糖构成主链，且有葡萄糖以α构型连在酮糖上。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1黄精概况

1.1.1黄精的来源

1.1.2黄精的资源分布

1.1.3黄精的药用历史

1.1.4黄精的化学成分

1.1.5黄精的药理作用

1.1.6黄精的开发利用现状

1.2黄精皂苷的研究现状

1.3黄精多糖的研究现状

1.4立题背景和意义

1.5主要研究内容

第二章黄精中皂苷的提取分离

2.1引言

2.2实验材料与仪器

2.2.1材料与试剂

2.2.2仪器与设备

2.3实验方法

2.3.1黄精皂苷的提取

2.3.2黄精中皂苷的分离

2.3.3纯度鉴定

2.4结果与讨论

2.4.1黄精皂苷的提取

2.4.2大孔吸附树脂柱层析粗分

2.4.3 ODS柱层析粗分

2.4.4 MCI柱层析细分

2.4.5纯度鉴定

2.4.6黄精中皂苷的提取分离流程

2.5本章小结

第三章黄精中乌苏酸型皂苷的结构鉴定

3.1引言

3.2实验材料与仪器

3.2.1材料与试剂

3.2.2仪器与设备

3.3实验方法

3.4结果与讨论

3.4.1化合物Ⅰ的结构鉴定

3.4.2化合物Ⅱ的结构鉴定

3.5本章小结

第四章黄精多糖降血糖活性的研究

4.1引言

4.2实验材料与仪器

4.2.1材料与试剂

4.2.2仪器与设备

4.3实验方法

4.3.1黄精多糖的提取

4.3.2糖尿病动物模型的建立

4.3.3黄精粗多糖对糖尿病小鼠血糖的影响

4.3.4统计学处理

4.4结果与讨论

4.4.1黄精多糖的提取

4.4.2糖尿病动物模型的建立

4.4.3黄精粗多糖对糖尿病小鼠血糖的影响

4.5本章小结

第五章降血糖活性多糖的提取分离与结构初探

5.1引言

5.2实验材料与仪器

5.2.1材料与试剂

5.2.2仪器与设备

5.3实验方法

5.3.1黄精多糖的提取

5.3.2黄精多糖的分离

5.3.3纯度鉴定

5.3.4黄精多糖的单糖组成分析

5.3.5核磁共振法分析

5.4结果与讨论

5.4.1薄层层析

5.4.2大孔吸附树脂柱层析粗分

5.4.3 DEAE-纤维素柱层析

5.4.4 Sephadex G-100柱层析

5.4.5 HW-40柱层析脱盐纯化

5.4.6纯度鉴定

5.4.7黄精多糖的提取分离流程

5.4.8黄精多糖的单糖组成分析

5.4.9黄精多糖的结构分析

5.5本章小结

主要结论

问题与展望

致谢

参考文献

附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文

附 图