环孢素A眼用微乳的研究

摘要

目前公认的眼干燥综合症(干眼症)是以液性泪液产生减少、黏液分泌异常和睑板腺功能障碍等各种原因引起的泪液膜液性成分的绝对和相对缺乏、眼表泪液分布异常、泪液蒸发增加为共同特征的综合征，是眼科相当常见的疾病之一。这种眼表的功能紊乱通常与机体的免疫系统紊乱或雄性激素分泌减少有关。 环孢素A(Cyclosporine A CsA)在眼科的应用越来越广泛，包括全身用药和局部用药。然而，环孢素全身用药受血-眼屏障等因素影响而难于进入眼内；此外，全身用药不仅价格昂贵，而且可能引起肾脏、肝脏毒性损害以及高血压等并发症，因此它在眼科的应用受到限制。目前环孢素在眼的局部用药主要是普通滴眼剂，如以油作为载体的眼用滴眼剂和普通乳剂等。由于环孢素分子量大且呈疏水性，眼内通透性差，难于在眼内达到治疗水平，影响了环孢素局部用药的疗效。 微乳是在表面活性剂存在下，有两种不混溶的液体形成的澄清透明的热力学稳定体系。微乳可分为水包油、油包水及双连续型三种结构。微乳易于制备，稳定透明，可采用过滤灭菌的优点，是一个有潜力的药物释放系统。 在处方前研究中，考察了环孢素A在不同pH介质中的平衡溶解度。通过滴定法绘制微乳的伪三元相图，并根据相图中微乳区确定了四组分微乳基本处方组分及处方候选区，以浊度法优化表面活性剂一助表面活性剂的配比，然后在三元相图中做直线，在微乳区内线段上向增加油的用量方向逼近，直至得到最优的处方组成。根据眼用制剂的特点，确定环孢素A眼用微乳的最佳处方为环孢素A 50mg、中链甘油三酸酯0.5g、聚氧乙烯蓖麻油2g、PEG4001g，水加至100ml。制备方法为：取处方量的中链甘油三酸酯、环孢素A，精密称定，置恒温水浴(25℃)中混合搅拌30min，药物溶解完全，加入处方量聚氧乙烯蓖麻油混合搅拌2hr，后加入PEG400搅拌30min，边搅拌边加入水相，制得透明的淡蓝色微乳。 建立了测定环孢素A眼用微乳含量的方法，对三批微乳进行了含量测定，结果表明，制剂质量符合要求。以pH、乳滴平均粒径、乳滴粒径多分散系数和主药含量为指标，通过高温(60℃)、强光(4500±500Lx)、加速(40℃，75％)、室温留样(25℃，60％)等试验评价环孢素A眼用微乳的稳定性，结果表明环孢素A眼用微乳各项指标符合有关规定，性质稳定。 采用家兔眼睛单次和/或重复给药进行环孢素A眼用微乳的临床前安全性评价，结果表明环孢素A微乳眼部用药安全，无眼部刺激性。 采用家兔眼睛进行环孢素A眼用微乳药效学评价。干眼症模型采用眼局部每日反复滴用1％硫酸阿托品的方法，连续数日后，根据泪液基础分泌、泪膜稳定性、泪液形状、角膜上皮完整性评价干眼模型。结果表明此方法能够使家兔眼睛在短期内形成干眼，能够用于环孢素A眼用微乳药效学评价。 家兔形成干眼后，在眼局部每日反复滴用1％硫酸阿托品的基础上，给予0.05％环孢素A眼用微乳，连续7日后，根据家兔毛发特征以及有关眼表因素(泪液基础分泌、泪膜稳定性、泪液形状、角膜上皮完整性)，进行药效学评价，试验结果表明0.05％环孢素A眼用微乳对干眼症有显著疗效，且无明显不良反应。

目录

声明

摘要

前言

第一部分微乳递药系统的处方前研究

一、仪器与试药

二、实验方法

(一)药物理化性质的研究

(二)影响微乳形成的因素考察

(三)分析方法的建立

三、结果与讨论

(一)环孢素A在不同的油中饱和溶解度的测定

(二)影响微乳形成的因素考察

(三)分析方法的建立

四、小结

第二部分处方与制备工艺的研究

一、仪器与材料

二、试验方法

(一)、微乳制备工艺的考察

(二)、处方优化

(三)、制备工艺的单因素研究

三、结果与讨论

(一)、微乳制备工艺的选择

(二)、处方优化

(三)、制备工艺的单因素研究

四、小结

第三部分质量评价与稳定性考察

一、仪器

二、实验部分

(一)、环孢素A眼用微乳的制备

(二)、质量评价

(三)、稳定性考察

三、结果与讨论

(一)、质量评价

(二)、稳定性考察

四、小结

第四部分初步安全性及药效学评价

一、初步安全性评价

(一)、仪器、试剂与动物

(二)、结果判定

(三)、结果与讨论

(四)、小结

二、药效学试验

(一)、仪器和试剂

(二)、试验方法

(三)、结果与讨论

(四)、小结

结论与展望

参考文献

致谢