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基于富血小板血浆(Platelet--rich Plasma)的生物活性支架的制备及其理化性能和修复软骨缺损的体外实验研究

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英文缩略语表

摘要

前言

材料与方法

1.实验动物、试剂及仪器

2.实验方法

结果

1.富血小板血浆中血小板计数

2.凝胶支架的微观结构

3.细胞增殖率测定

4.细胞活力测定

5.生物化学成分分析

6.组织学和免疫组化染色

7.实时荧光定量PCR结果分析

8.组织工程化软骨与软骨环整合状况

讨论

结论

参考文献

附录 Platelet-rich plasma combined with agarose as a bioactive scaffold to enhance cartilage repair:An in vitro study

综述 软骨组织工程学支架材料的临床研究进展

攻读学位期间发表文章及获奖情况

致谢

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摘要

目的:研究富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架作为一种新型的生长因子缓释材料对软骨细胞生长的有效性及对软骨缺损长期修复的可行性。 方法:取成年猪的软骨细胞,分别接种于琼脂糖凝胶和富血小板血浆-琼脂糖凝胶中,培养28日,并于第7日,第14日,第28日行组织学、生物化学、生物力学、实时定量荧光PCR等技术分析两种凝胶中软骨细胞生长的差异;体外软骨环模型用于分析支架与软骨整合的情况,并行组织学和生物力学分析。 结果:激光共聚焦显微镜(SEM)显示出两种凝胶支架都具有高度均一的孔隙结构;活死细胞鉴定表明两种支架中的软骨细胞几乎100%存活。培养28天后,富血小板血浆-琼脂糖中的糖胺聚糖、胶原、DNA含量及软骨细胞相关基因表达远远高于单纯琼脂糖凝胶支架。实验组的界面整合力的测量同样大于对照组。 结论:富血小板血浆与琼脂糖结合后显示出对软骨细胞增殖、分化及与正常软骨整合都非常良好的效果。我们的研究提示富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架是一种有前景的生物活性支架,对未来的软骨组织工程研究及临床治疗软骨缺损有积极的影响。

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