改良法制备富血小板血浆促进体外原代培养成骨细胞增殖的实验研究

摘要

目的　探讨富血小板血浆 (platelet- rich plasma,PRP)来源的富生长因子血清 (serum rich in growthfactors,SRGF)对体外原代培养的大鼠和人成骨细胞增殖的影响。　方法　改良法分别制备大鼠和人 SRGF和贫生长因子血清 (serum poor in growth factors,SPGF) ,EL ISA法测定人 SRGF和 SPGF中转化生长因子 β1 (transforminggrowth factorβ1 ,TGF- β1 )和血小板源性生长因子 AB(platelet- derived growth factor AB,PDGF- AB)浓度 ;原代培养并传代大鼠和人成骨细胞 ,取第 3代大鼠成骨细胞和第 4代人成骨细胞各自分为 3组 ,分别加入 5 %相应种属的 SRGF、SPGF和无血清细胞培养基 ,2 4、4 8、72和 96 h用 MTT法检测成骨细胞的增殖。　结果　 EL ISA法测定人 SRGF中TGF-β1 浓度为 30 7.6 7± 35 .5 7ng/ml,PDGF- AB浓度为 5 2 .76± 7.89ng/ml;大鼠和人成骨细胞在相应种属的 SRGF作用下 ,细胞增殖迅速 ,细胞数量维持在较高水平 ,其吸光度 (A)值在各时间点与 SPGF组相应数值比较 ,发现大鼠成骨细胞在 4 8和 96 h细胞增殖差异有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,而人成骨细胞增殖差异在 4 8、72和 96 h均有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ;两种成骨细胞在无血清培养基中增殖基本停滞 ,与同时间点 SRGF组比较 。