离子色谱法和高效液相色谱法测定奶粉中胆碱含量的研究

摘要

胆碱(choline)是强有机碱性化合物，以游离态胆碱、乙酰胆碱和复合磷脂的形式广泛存在于生物机体中。它是动物生长过程中不可缺少的一种水溶性维生素。<'[1]>研究表明，<'2-3>它在脑发育和开发认知、记忆与学习能力方面有很重要的作用。对于脑发育关键时期的婴儿，在婴儿配方及奶粉中添加胆碱是十分必要的。<'[4-5]>它的另一个主要作用是促进肝脏机能。如果缺乏胆碱，特别是老年人可能引起脂肪肝、肝硬化、动脉硬化，也可能引起老年痴呆症。<'[6]>以往测定胆碱的方法有高氯酸非水滴定法<'[7]>、雷氏盐比色法<'[7-9]>和雷氏盐重量法。<'[10]>现行的国家标准<'[11]>GB/T 5413.20-1997采用的是酶反应显色分光光度计法检测胆碱含量。这些传统方法操作繁琐，选择性差，干扰因素多，无法鉴别掺入的廉价无机氯化物和胺类等物质。<'[12]>近些年可参见的文献中有高效液相色谱—电化学检测法、<'[11]>化学发光法、<'[13]>离子色谱—电导检测法<'[5、11、15-17]>等，但尚未见高效液相色谱—蒸发光散射检测法及高效液相色谱一质谱法对胆碱含量检测的报道。 本论文建立了离子色谱法、高效液相色谱—蒸发光散射检测法及高效液相色谱—质谱法三种方法对奶粉中胆碱含量的测定，并将此三种方法进行对比讨论。通过正交试验设计法Lg(3<'3>)，固定奶粉质量5.00g，盐酸体积30mL，设计盐酸浓度(0.5mol/L、0.8mol/L、1.0mol/L，三水平)，反应温度(60℃、70℃、80℃三水平)，反应时间(3h、4h、5h三水平)，寻找到奶粉前处理的最佳酸水解条件是1mol/L，盐酸70℃下反应3小时。最后还对离子色谱测定奶粉中胆碱含量的方法做出不确定度的分析和评定。 三种方法对胆碱含量测定的最低检测限分别为0.1mg/L、0.2mg/L和0.01mg/L，相对标准偏差分别为1.13％、2.67％和3.86％，添加回收率分别为98.78％～100.72％、96.72％～102.03％和91.67％～100.02％。方法操作简单，灵敏度高，选择性强，能克服传统方法中繁琐，准确度低等缺陷和不足。本论文丰富了奶粉中胆碱的含量测定的方法同时对其他同类产品中胆碱含量的测定提供了参考。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

1.1胆碱的研究概况

1.1.1胆碱的结构与基本性质

1.1.2胆碱的功能及生理作用

1.1.3胆碱来源及添加情况

1.1.4胆碱含量检测方法的介绍

1.2离子色谱法简介

1.2.1离子色谱法原理

1.2.2离子色谱仪

1.2.3离子色谱法的应用

1.3高效液相色谱法简介

1.3.1 HPLC-ELSD原理及应用

1.3.2 HPLC-MSD原理及应用

1.4测量不确定度的简介

1.4.1测量不确定度的产生及其发展

1.4.2测量不确定度表述名词、术语

1.4.3测量不确定度的来源

1.4.4测量不确定度分量的量化和评定

1.5研究内容及意义

第二章离子色谱法对奶粉中胆碱含量的测定

2.1实验部分

2.1.1仪器与试剂

2.1.2从奶粉中提取胆碱的方法的建立

2.1.3正交试验设计

2.1.4离子色谱法检测方法的建立

2.1.5标准曲线的绘制和最低检测限

2.1.6加标回收率和精密度

2.2结果与讨论

2.2.1酸水解条件的正交优化选择

2.2.2标准曲线和最低检测限

2.2.3渗析时间和转移时间的优化

2.2.4加标回收率和精密度结果

2.2.5色谱条件优化

2.3本章小结

第三章高效液相色谱法对奶粉中胆碱含量的测定

3.1 HPLC-ELSD法对奶粉中胆碱含量的测定

3.1.1实验部分

3.1.2结果与讨论

3.2 HPLC-MSD法对奶粉中胆碱含量的检定

3.2.1实验部分

3.2.2结果与讨论

3.3 IC、HPLC-ELSD及HPLC-MSD三种方法的对比分析

3.4本章小结

第四章离子色谱法测量不确定度的分析和评定

4.1分析过程中不确定度的来源

4.2不确定度分量的量化和评定

4.2.1 A类不确定度的评定

4.2.2 B类不确定度的评定

4.2.3合成相对标准不确定度的确定

4.2.4扩展不确定度的确定

4.3测量结果及其不确定度的报告

第五章结语

参考文献

致 谢

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