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【6h】

微生物酶法制备可溶性玉米肽的研究

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文摘

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引言

第一章 玉米蛋白粉的组成及应用现状

一.醇溶蛋白的特性及应用

二.玉米黄色素的提取及应用

三.酶解玉米蛋白粉制备功能肽

1 原料的选择

2 玉米蛋白粉的水解方式

3 玉米蛋白水解物的理化性质和生理活性

4 玉米蛋白水解物在食品中的应用

四.本论文的研究内容

第二章 实验部分

参考文献

致谢

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摘要

玉米蛋白粉是玉米淀粉加工的副产物,它含蛋白质50-70%。玉米蛋白粉经酶解产生的玉米肽具有多种生理活性,如良好的吸收性,抗氧化性,消除疲劳,降低血氨浓度,降血压以及促进乙醇代谢等功能。因此,玉米多肽的制备研究受到人们的极大关注。
   本课题主要进行微生物酶酶解大分子玉米蛋白,制备玉米多肽的研究。从土样中筛选到一株细菌将其命名为0709,对其进行的包括形态,生理生化特性以及16sDNA序列等特性进行了研究,分析结果显示:该菌呈杆状,革兰氏阳性,有芽孢,无英膜,菌落表面干燥且边缘规则。能利用葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、木糖、甘露糖、海藻糖做为唯一碳源生长,不能利用半乳糖、棉籽糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露醇、卫矛醇、山梨醇、乳糖做为唯一碳源。V-P测定阳性,柠檬酸盐试验阳性。产生吲哚,能利用硝酸盐及亚硝酸盐。菌株的主要酶学特性为氧化酶阴性,过氧化氢酶阳性,明胶液化,具淀粉酶、蛋白酶活性,通过16SrDNA序列比对后,初步确定该菌株为蜡样芽孢杆菌,命名为Bacillus cereus sp.ds0709。
   通过单因素和正交试验确定了该菌株的最佳发酵产酶条件,最佳发酵时间为54h,最佳发酵温度为40℃,最佳pH值为7.0,最佳接种量为3ml.
   发酵液经过滤,得到粗酶液。用高温高压,高碱研磨,加1%氯化钠三种方法对玉米蛋白粉进行了预处理。分别用碱性蛋白酶以及粗酶液对其进行酶解,实验结果表明,与碱性蛋白酶相比,粗酶液对经1%氯化钠预处理的蛋白粉有较好的降解效果。
   采用离心,超滤,硫酸铵沉淀,及DEAE-SephadexG-50离子交换层析,Sephacryls-100柱层析,透析,冻干等手段,对该菌株所产蛋白酶进行了分离纯化。SDS-PAGE分析结果表明该酶亚基分子量分别为21kda与32kda,初步确定该蛋白酶可能为多亚基酶。

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