杜仲中降压活性成分的分离和表征研究

摘要

论文在调研大量文献的基础上，以杜仲(Eucommia ulmoide Oliver)中降血压药用活性成分为目标，对湖南产杜仲进行了环烯醚萜类化合物的提取、纯化、分离分析与结构表征研究，从杜仲中提取分离了具有明显生物活性的成分—京尼平苷酸和京尼平苷。系统地研究了杜仲中京尼平苷酸和京尼平苷的提取、纯化、分离的工艺条件，所得到的单体通过HPLC、UV、IR、HNMR、MS等仪器手段进行定性、定量分析，确定了其结构。为开发利用杜仲提供了实验依据与基础。具体内容摘要如下： 1．京尼平苷酸和京尼平苷的提取。系统地研究了乙醇溶剂提取法、酶提取法、半仿生提取法和CO<,2>超临界提取法从杜仲中提取环烯醚萜类化合物京尼平苷酸和京尼平苷，对这四种方法的提取效果进行了比较，得到了最优提取工艺一半仿生法提取，取10g样品，加入100mL的蒸馏水，调节pH=1.5，在60℃下提取1.5h，过滤后再依次用pH=7.5和pH=8.5的水在相同条件下提取二次，京尼平苷酸和京尼平苷的得率分别达1.50％和0.49％。 2．京尼平苷酸和京尼平苷的纯化。首先选择了溶剂萃取方法进行一次纯化，再系统地比较了硅藻土吸附、活性炭吸附、聚酰胺柱色谱和A型大孔吸附树脂纯化杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸，选择A型大孔吸附树脂法纯化杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸，优化了纯化工艺，总收率分别达到84.15％和73.49％。 3．杜仲中活性单体的分离。采用硅胶柱色谱法分离环烯醚萜类化合物纯化后产品，得到高纯度的京尼平苷和京尼平苷酸单体。采用硅胶将样品低温吸附，挥发去除溶剂，烘干后上柱，用不同配比的氯仿和甲醇混合液洗脱，同时用高效液相色谱法(DAD检测器)跟踪检测，所得京尼平苷酸和京尼平苷产品纯度分别达98.69％和96.54％。并对制备型高效液相色谱制备京尼平苷和京尼平苷酸进行了探讨。 4．杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸的纯度测定和结构鉴定。采用HPLC-DAD对杜仲提取液和分离纯化中间产物进行定性定量分析。通过实验确定分析条件为：色谱柱， VP—ODS RP-18柱(150mm×4.6mm，预柱10mm×4.6mm)；流动相，甲醇∶水∶冰乙酸=20∶79.5∶0.5(V／V)；流速，1.0mL／min，检测波长，237nm，同时DAD检测；进样量，10μL；柱温，25℃。并采用紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振(NMR)和质谱(MS)四种分析方法确定从杜仲中分离得到的2个化合物的结构，分别鉴定为京尼平苷酸和京尼平苷。

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

第一章绪论

第二章杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸的提取

第三章杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸的纯化

第四章杜仲中京尼平苷酸和京尼平苷的分离

第五章杜仲中京尼平苷和京尼平苷酸的测定及结构鉴定

第六章总结

参考文献

攻读硕士学位期间主要的研究成果

致谢