IL-17诱导哮喘急性发作期患者外周血CD4+T细胞分泌IL-8

摘要

研究目的支气管哮喘(哮喘)是慢性持续性气道炎症疾病,多种炎性细胞和炎性介质参与其过程。目前普遍认为辅助性T淋巴细胞(CD4~+T细胞)两种亚型Th1、Th2的失衡是哮喘发病的重要机制。近年来发现了一类新的CD4~+T细胞亚群,即Th17细胞,在哮喘的发生发展中起着重要的作用。Th17细胞重要的效应因子是IL-17。IL-8是中性粒细胞趋化、聚集和活化的重要细胞因子。研究发现哮喘急性发作患者痰液及外周血中IL-17、IL-8均明显高于缓解期及健康人;用IL-17刺激体外培养的人支气管上皮细胞可以引起IL-8的产生,诱导中性粒细胞在气道中的聚集,从而使哮喘病情加重甚至恶化;哮喘患者外周血中CD4~+T细胞IL-8表达水平明显高于正常人;CD4~+T细胞亚群中IL-17是Th17细胞特异分泌的,因此,我们假设IL-17促进CD4~+T细胞分泌IL-8,可能是Th17细胞参与哮喘发病机制之一。
　　方法：收集健康人,哮喘急性发作期轻、中度病人各4例,三组患者性别、年龄比较无显著性差异,具有可比性。各取外周血60ml,免疫磁珠分离、纯化外周血CD4~+T细胞,流式细胞仪检测细胞纯度,台盼蓝拒染色法测细胞活力,然后哮喘急性发作期患者外周血CD4~+T细胞分成四组进行培养,分别加入重组hIL-17(A组),重组hIL-17+anti-hIL-17Ab(B组),hIL-17+hIgG(C组)及原液培养(D组);健康对照组进行原液培养(E组)。培养36h时,用ELISA法测定培养上清液中IL-8的浓度。
　　结果：1.哮喘急性发作期患者外周血CD4~+T细胞原液培养上清液的IL-8浓度(D组)高于健康原液组(E组)(均P<0.05),哮喘急性发作期中度患者外周血CD4~+T淋巴细胞培养上清液的IL-8浓度较哮喘急性发作轻度患者组明显增加,且与病情严重程度呈正相关(r=0.764,P=0.02α=0.05);2.哮喘急性发作期患者的外周血CD4~+T细胞培养后上清液中的IL-8浓度变化为:A组、C组>D组>B组,差异有统计学意义。(均P<0.05)3.哮喘急性发作期患者的外周血CD4~+T细胞培养分泌的IL-8浓度与FEV1占预计值％呈负相关。(r=-0.762,P=0.028)
　　结论：1、哮喘急性发作期患者外周血CD4~+T细胞分泌IL-8并与病情严重程度及通气功能障碍有关;2、IL-17促进哮喘急性发作期患者外周血CD4~+T细胞分泌IL-8。3、Th17细胞可能通过IL-17促进IL-8分泌参与哮喘急性发作期的病理生理过程。

目录

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英文缩略词表

论文正文

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.2 材料

2.3 方法

第三章 结果

3.3.1 流式细胞分析结果

3.3.2 细胞培养结果

3.3.3 细胞活力测试结果

3.3.4 细胞培养上清液中IL-8浓度变化及与哮喘严重程度和肺功能的关系

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢