CRH对人子宫平滑肌细胞Cx43磷酸化水平及细胞间隙连接通讯的影响

摘要

目的:探讨人类促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对人子宫平滑肌细胞间隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化水平以及其对子宫平滑肌细胞间隙连接通道(GJIC)功能的影响。
　　 方法:原代培养人未孕子宫平滑肌细胞,给予不同浓度的CRH(0,5.85pm/l,58.5pm/l,585pm/l,5850pm/l)进行干预,采用western blot分别定量检测CRH各浓度组中子宫平滑肌细胞磷酸化Cx43与非磷酸化Cx43蛋白的表达；用细胞划痕实验检测CRH各浓度组中细胞间隙连接通道功能的变化。
　　 结果:1、CRH对人子宫平滑肌中P-Cx43与NP-Cx43蛋白表达的影响:对照组及CRH干预后各浓度组子宫平滑肌细胞中磷酸化Cx43蛋白的表达(相对灰度值)分别为:0.10±0.002,0.26±0.030,0.31±0.011,0.51±0.006,0.61±0.035,各组之间比较有统计学差异(P＜0.01),且有剂量依赖趋势；而非磷酸化Cx43蛋白的表达(相对灰度值)分别为:0.21±0.011,0.20±0.012,0.21±0.09,0.20±0.05,0.21±0.01,各组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05)；2、CRH对子宫平滑肌细胞间隙连接通讯功能的影响:对照组及CRH干预后各浓度组荧光黄染料在子宫平滑肌细胞中传输的细胞级数分别为0.83±0.40,2.17±0.40,3.67±0.52,8.33±0.52,9.33±0.55(个),各组之间比较有统计学差异(P＜0.01)。同时,随着CRH干预浓度的递增,荧光黄染料传输至最远细胞级所需要的时间分别为:8.33±0.52,7.33±0.52,5.33±0.82,1.67±0.52,1.17±0.41(分钟),各组之间比较有统计学差异(P＜0.01)。
　　 结论:在原代子宫平滑肌细胞中,CRH可以上调磷酸化Cx43蛋白的表达,增强细胞间隙连接通道的功能。

目录

文摘

英文文摘

缩略语表

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 标本来源

2.2 主要试剂

2.3 主要仪器

2.4 主要工作液

2.5 未孕子宫平滑肌细胞原代培养

2.6 免疫印迹

2.7 细胞划痕

2.8 统计学方法

第三章 结果

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢