雌激素对ICP患者CD4+T雌激素受体的表达及其IFN-γ、IL-4分泌的影响及意义

摘要

目的:研究雌二醇对ICP患者CD4+T淋巴细胞的雌激素受体的表达及其淋巴细胞因子分泌的变化与ICP发病的关系
　　方法:选择2012年3月～2012年9月在中南大学湘雅二医院，湘雅三医院妇产科住院分娩的ICP患者40例作为研究组。同期正常妊娠晚期孕妇30例作为对照组，对两组患者采用磁珠分选结合流式细胞分选技术检测CD4+T淋巴细胞中IFN-γ阳性细胞比值、IL-4阳性细胞比值。Real-time PCR方法检测不同浓度雌二醇对CD4+T淋巴细胞ERα表达水平，用ELISA方法检测不同浓度雌二醇对CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ、IL-4的分泌变化。用ANOVA方差分析和SNK-q检验，分析各组CD4+T淋巴细胞中IFN-γ阳性细胞比值、IL-4阳性细胞比值的变化，及不同浓度雌激素对CD4+T淋巴细胞的ERα表达水平和对CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ、IL-4的分泌变化。
　　结果:1.两组CD4+T淋巴细胞中IFN-γ阳性细胞的比值(％):ICP重度组（36.99±2.47）、ICP轻度组（32.10±3.08）均高于正常组（31.21±2.48），ICP重度组高于ICP轻度组，差异均具有统计学意义(P＜0.05);两组CD4+T淋巴细胞中IL-4阳性细胞比值:ICP重度组（8.32±2.15）、ICP轻度组（9.64±2.07）均明显低于正常组（12.10±2.90），ICP重度组明显低于ICP轻度组，差异均具有统计学意义(P＜0.05)。
　　2.两组在无雌激素作用情况下CD4+T淋巴细胞的ERα相对表达水平:ICP重度组（2.76±0.19）、ICP轻度组（1.48±0.2）均高于正常组(1.00)，ICP重度组高于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05);在0.7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞ERα相对表达水平: ICP重度组(4.50±0.22)、ICP轻度组(2.63±0.16)均高于正常组（1.65±0.21），ICP重度组高于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05)。在7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞ERα相对表达水平:ICP重度组（5.84±0.22）、ICP轻度组（3.80±0.21）均高于正常组（1.98±0.17），ICP重度组高于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05)。同组中在0.7μM、7μM浓度雌二醇刺激下与无雌激素刺激下比较CD4+T淋巴细胞ERα表达均上调，雌激素高浓度与低浓度刺激比较CD4+T淋巴细胞ERα表达水平升高，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。
　　3.两组在无雌激素刺激的作用下CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ的分泌水平(pg/ml):ICP重度组（632.04±5.53）、ICP轻度组（543.46±6.49）均高于正常组(414.44±0.97)，ICP重度组高于ICP轻度组，差异均具有统计学意义（P＜0.05）;在0.7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ的分泌水平(pg/ml): ICP重度组（520.06±0.44）、ICP轻度组（414.52±5.10）均高于正常组（349.62±8.84），ICP重度组高于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05)。在7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ的分泌水平（pg/ml）:ICP重度组（447.86±0.68）、ICP轻度组（362.70±8.37）均高于正常组(257.49±16..10)，ICP重度组高于ICP轻度组。差异均具有统计学意义（P＜0.05）。同组中在0.7μM、7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ的分泌水平与无雌激素作用下的分泌水平相比较均下降，雌激素高浓度与低浓度刺激相比较CD4+T淋巴细胞因子IFN-γ分泌水平升高，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。
　　4.两组在无雌激素刺激的作用下CD4+T淋巴细胞IL-4的分泌水平(pg/ml):ICP重度组（114.62±1.99）、ICP轻度组（145.87±2.33）均低于正常组（183.69±2.65），ICP重度组低于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05);在0.7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞IL-4因子的分泌水平(pg/ml):ICP重度组（155.97±4.65）、ICP轻度组（190.27±2.65）均低于正常组（217.05±1.99），ICP重度组低于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05)。在7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞因子IL-4的分泌水平(pg/ml):ICP重度组（309.39±2.33）、ICP轻度组（371.88±3.65）均低于正常组（463.74±1.33），ICP重度组低于ICP轻度组。差异均具有统计学意义(P＜0.05)。同组中在0.7μM、7μM浓度雌二醇刺激下CD4+T淋巴细胞IL-4因子的分泌与无雌激素刺激下比较均上升，雌激素高浓度与低浓度刺激相比较CD4+T淋巴细胞因子IL-4的分泌量增多，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。
　　结论:1.在ICP患者外周血CD4+T淋巴细胞中，Th1型细胞IFN-γ比值上升，Th2型细胞IL-4比值下降，Th1细胞因子的分泌增加，Th2型因子的分泌减少，其变化与ICP病情相关。
　　2.随着ICP患者E2浓度的升高，雌激素能使CD4+T淋巴细胞中ERα表达上调，并与雌激素呈浓度依赖性，并促进CD4+T淋巴细胞Th2型因子IL-4的分泌，抑制Th1细胞因子IFN-γ分泌，导致Th1-Th2因子偏移。
　　3.在ICP患者中，E2对CD4+T淋巴细胞的影响在ICP发生过程当中有可能是双效的，一方面通过上调ERα增加雌激素对疾病发生的敏感性，另一方面，通过调节Th1-Th2漂移抵抗疾病的发生。图14幅，表6个，参考文献45篇。