应用延时摄像技术筛选优质胚胎

摘要

研究目的:目前人类辅助生殖技术中主要依据静止的形态学指标来评价体外发育胚胎质量。而近年来出现的胚胎延时摄像技术（time-lapse）能够对胚胎体外发育过程进行全程监控，根据胚胎行为学指标来评估胚胎的发育潜能。本研究旨在应用延时摄像技术(time-lapse)观察单原核(1PN)和正常受精双原核(2PN)胚胎的体外发育过程，结合染色体分析结果，根据其发育行为学特点筛优质胚胎供移植。
　　材料与方法:单原核胚胎来源于D1上午观察为单个原核的临床废弃IVF/ICSI胚胎。双原核胚胎为卵泡液中回收的废弃M2期卵母细胞行卵胞浆内单精子注射(ICSI)胚胎。均于D1上午放入WOW皿培养并开始拍摄（拍摄仪器Primo Vision System，拍摄频率5min/次，曝光时间70ms/次）。连续拍摄5～7天至囊胚形成。激光活检法取约10个囊胚滋养层细胞进行全基因组扩增，再通过全基因组测序检测染色体情况。根据视频记录分析胚胎发育异常现象与卵裂时间、囊胚形成能力及染色体之间的关系。
　　结果:
　　1、早期胚胎发育过程中存在分裂异常、旋转、胞质收缩不分裂、卵裂球重吸收、不等大、分裂次序错乱、核重现/多核等不同类型的异常现象。
　　2、各种类型的发育异常现象中，旋转的发生率最高，其次是分裂异常，其他异常发生率均较低。
　　3、异常现象可以发生在胚胎卵裂的各个时期，主要集中在前两次卵裂过程，涉及多个时期的复合异常情况也较多。
　　4、发育异常能够降低胚胎的囊胚形成能力，但部分出现发育异常的胚胎也能形成优质囊胚。
　　5、各时期的发育异常对胚胎卵裂时间没有明显影响。
　　6、发育异常胚胎更容易出现染色体异常，但部分胚胎能够排除异常卵裂球形成染色体正常的囊胚。
　　结论:
　　应用time-lapse延时摄像技术对胚胎体外发育过程进行全程监控，根据胚胎发育过程中的分裂异常、旋转、胞质收缩不分裂、卵裂球重吸收、不等大、分裂次序错乱、核重现/多核等现象，可以初步评价囊胚形成能力和囊胚的染色体组成。但是由于胚胎的自我校正作用，某些发育异常的胚胎也能形成优质的染色体正常囊胚。进一步的动态指标挖掘和指标有效性的判定还需要更大样本量的研究，尤其是临床前瞻性研究。

目录

声明

摘要

缩写词中英文对照表

实验技术路线

第一章 前言

第二章 材料与方法

2．1 材料来源

2．2 主要仪器设备

2．3 主要试剂及耗材

2．4 胚胎培养及延时摄像

2．5 数据收集与分析

2．6 囊胚染色体分析

第三章 结果

3．1 发育异常的类型

3．2 各种发育异常的发生率

3．3 各时期异常的发生率

3．4 发育异常对囊胚形成能力的影响

3．5 发育异常对卵裂时间的影响

3．6 发育异常对染色体的影响

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述 延时摄像技术在人类辅助生殖技术中的应用

致谢