丹皮酚减轻β-淀粉样蛋白在AD脑内的炎性损伤及其机制研究

摘要

目的：研究AD(Alzheimer disease)的发病机制，探讨丹皮酚(Pae)在减轻β-淀粉样蛋白在AD脑内的炎性损伤的可能作用机制。
　　方法：1.利用Morris水迷宫行为学检测方法对大鼠做定位航行的测试。2.建立体外孵育Aβ注入大鼠海马制备AD动物模型和AD海马脑片两种模型，Pae对其进行干预治疗（Ⅰ.30天处理组;Ⅱ.15天处理组）。HE染色法观察各处理组脑组织病理学改变。3.采用Western blot与免疫组织化学方法检测各组动物脑组织GFAP、CD11b和NFκB的表达水平，免疫组化检测TNFα、IL-1β炎性因子表达水平的变化。4.Tunel法检测凋亡细胞，分析Aβ对各组大鼠大脑细胞凋亡的影响以及Pae治疗的作用。
　　结果：1.Morris水迷宫行为学检测发现AD模型组在寻找平台时较正常对照组和假手术组大鼠，潜伏期明显延长，表明AD模型动物学习、记忆能力下降，Pae治疗组的模型鼠潜伏期缩短，其中PaeⅠ治疗组与模型组比较具有统计性差异(P＜0.05);2.HE染色观察到正常对照组和假手术组海马组织结构完好，AD模型组神经元排列紊乱，细胞体积缩小，数量减少，大量细胞胞核固缩且深染。Pae各治疗组脑组织较模型组病变均减轻，其中PaeⅠ组改善明显，细胞核固缩神经元明显减少;3.GFAP和CD11b在模型组表达量明显增高(P＜0.05)，显示星形胶质细胞和小胶质细胞均被过度激活，Pae治疗组活化的胶质细胞减少，其中PaeⅠ组活化的胶质细胞较模型组显著减少(P＜0.05);4.NFκB、TNFα和IL-1β在AD模型组中表达水平均显著上升，Pae各治疗组中各炎性因子表达均受到抑制，且PaeⅠ治疗组各因子的表达量较模型组显著降低(P＜0.05);5.AD模型组凋亡细胞较正常对照组和假手术组明显增多(P＜0.05)，PaeⅠ治疗组凋亡细胞显著减少，与模型组比较具有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论：Aβ能激活脑内神经胶质细胞，促进生成大量炎性细胞因子，损伤神经元，引起细胞凋亡。Pae可能通过抑制NFκB的表达，下调下游促炎性因子TNFα和IL-1β等的表达，减轻脑内炎症反应，减少细胞凋亡，保护神经元，从而在AD中发挥抗炎和抗凋亡的作用，改善Aβ引起的记忆和学习能力的下降，延缓AD的发展。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

1 绪论

2 实验动物与材料

2．1 实验动物

2．2 试剂与耗材

2．3 主要仪器设备

3 方法

3．1 试剂配制

3．2 动物分组与模型的建立

3．3 Morris水迷宫行为学检测方法

3．4 标本处理

3．5 HE染色

3．6 免疫组织化学染色方法

3．7 Western blot方法检测GFAP、CD11b、p-NFκB的表达水平

3．8 Tunel法检测脑组织凋亡细胞

4 结果

4．1 Morris水迷宫行为学检测结果

4．2 HE染色结果

4．3 观察海马脑片生长状况

4．4 免疫组化和Western blot检测两种不同AD模型中GFAP和CD11b的表达

4．5 免疫组化和Western blot检测AD动物模型中NFκB的表达

4．6 免疫组化检测AD模型中TNFα、IL-1β的表达

4．7 Tunel细胞凋亡检测结果

5 讨论

6 结论

参考文献

综述 炎性体在阿尔茨海默中的作用

在读硕士期间的研究成果及发表的学术论文

致谢