肺炎支原体LAMPs经PI3K/Nrf2诱导人单核细胞表达HO-1

摘要

目的：
　　探讨肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，Mp）脂质相关膜蛋白（lipid-associated membrane proteins，LAMPs）对人单核细胞表达血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）的影响，并探讨可能的调控机制。
　　方法：
　　体外培养THP-1细胞，用不同浓度的LAMPs作用后，分别采用realtime-PCR和Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白的表达。同时采用不同浓度的放线菌素D（ActD）和放线菌酮（CHX）预处理细胞，观察其对HO-1表达的影响，以证实HO-1的表达是否通过转录和翻译水平；提取LAMPs作用前后的核蛋白，凝胶迁移率实验检测Nrf2的核转位、Western blot检测Akt的磷酸化情况；同时采用PI3K抑制剂LY294002处理细胞，观察其对LAMPs诱导Nrf2核转位及HO-1表达的影响；最后采用 siRNA干扰Nrf2表达，以证实Nrf2是否参与调控HO-1表达。
　　结果：
　　(1)0～5μg/mL LAMPs能以剂量依赖性方式诱导THP-1表达HO-1 mRNA和蛋白；
　　(2)5μg/mL LAMPs能诱导THP-1细胞Akt磷酸化，并能增强其DNA结合活性；PI3K抑制剂 LY294002处理后，可明显抑制 LAMPs诱导的HO-1表达和Nrf2核转位；
　　(3)干扰Nrf2表达后，可明显下调LAMPs诱导THP-1细胞表达HO-1；
　　结论：
　　LAMPs可诱导THP-1细胞表达HO-1，其机制可能与PI3K/Nrf2通路有关。

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