COX-2抑制剂对脂变肝细胞细胞衰老及p53、p21基因表达的影响

摘要

目的：探究COX-2抑制剂对脂变肝细胞细胞衰老的影响及其相关机制。
　　方法：本研究首先以SD大鼠为研究对象，将SD大鼠随机分为正常对照组（A组），NAFLD组（B组），NAFLD+尼美舒利组（C组），B、C组大鼠饲养高脂饮食建立非酒精性脂肪肝模型，相应处理后，采集大鼠静脉血检测血清TG、TC、ALT、AST的情况，取大鼠肝组织固定切片，HE染色观察大鼠肝组织病理学改变，β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老。在动物实验的基础上，以人正常肝细胞LO2为研究对象,采用油酸作为诱导剂，构建体外肝细胞脂变模型，MTT、油红O染色及细胞内TG检测筛选出构建脂变模型的最佳条件。在肝细胞脂变模型的基础上，将细胞分为正常对照组（A组）、脂变组（B组）、脂变+尼美舒利组（C组），相应处理后，对各组细胞作β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老，qRCR检测p53、p21基因的表达。
　　结果：
　　动物实验：
　　1.血清TG、TC、ALT、AST及HE染色结果：与A组相比，B组大鼠肝组织脂变及炎症程度显著增加（P<0.05），与B组相比，C组大鼠肝组织脂变及炎症程度程度明显减轻（P<0.05）。
　　2.β-半乳糖苷酶染色结果：与A组相比，B组的衰老指数明显下降（P<0.01），与B组相比，C组的衰老指数明显增加（P<0.01）。
　　细胞实验：
　　1.MTT、油红O染色、细胞内TG检测结果：以20μg/ml浓度油酸诱导72h构建肝细胞脂变模型的效果最佳。
　　2.β-半乳糖苷酶染色结果：与A组相比，B、C组的细胞衰老显著增加（P<0.01），与B组相比，C组的细胞衰老明显增加（P<0.01）。4..qRCR结果：与A组相比，B、C组p53、p21基因的表达上调，其中p53基因表达明显上调（P<0.05），与B组相比，C组p53、p21基因的表达均明显上调（P<0.01）。
　　结论：
　　1.COX-2抑制剂尼美舒利可以促进脂变肝细胞模型的细胞衰老；
　　2.COX-2抑制剂尼美舒利可能是通过上调p53、p21基因的表达促进脂变肝细胞细胞衰老。

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第1章 前 言

一、研究表明，细胞衰老在NAFLD发生发展中具有重要作用

二、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）是否参与非酒精性脂肪肝细胞衰老的形成？

第2章 材料和方法

2.1实验材料

2.2实验方法

2.3统计学处理

第3章 实验结果

3.1动物实验结果

3.2细胞实验结果

第4章 讨 论

1.COX-2抑制剂对脂变肝细胞脂肪变性的影响

2.COX-2抑制剂对脂变肝细胞细胞衰老的影响

3.COX-2抑制剂对脂变肝细胞p53、p21基因表达的影响

第5章 结 论

参考文献

综述:Relation Between Cellular SenescencesAnd Liver Diseases?

硕士期间撰写论文及获奖情况

致谢