串叶松香草多酚和黄酮的提取纯化工艺、活性测定及其成分分析

摘要

盛花期的串叶松香草（Silphium?perfolialum?L.）茎、叶片和花朵中含有丰富的黄酮和多酚类物质，串叶松香草作为一种广泛的可替代生物能源植物，仍然只作为牧草被利用，对其中多酚和黄酮的纯化工艺及其具体成分鲜有研究。因此，提取纯化串叶松香草中的多酚和黄酮及鉴定其化学成分对未来开发临床治疗药物具有重要意义。通过响应面优化法，确定了最佳提取工艺条件并考察了串叶松香草提取物的体外抗氧化性能;提取出来的多酚和黄酮采用树脂进行纯化处理，利用超高效液相对纯化后的多酚黄酮混合物进行主要成分的分析。 （1）串叶松香草多酚的最佳提取工艺条件为：液料比29∶1（mL/g）、提取时间94 min、提取温度39℃、乙醇体积分数60%，多酚含量平均值为24.60 mg/g。串叶松香草黄酮的最佳提取工艺条件为：液料比31∶1（mL/g）、提取时间130 min、提取温度38℃乙醇体积分数42%，黄酮含量平均值为38.81 mg/g。 （2）串叶松香草体外抗氧化活性测试串叶松香草中多酚和黄酮提取物对DPPH自由基和ABTS自由基有较好的清除能力，同时还具有一定的还原力，因此串叶松香草有较好的抗氧化能力。 （3）多酚纯化：选用AB-8型树脂，吸附时间为4 h，吸附量为2.72 mg/g，pH为4多酚纯化吸附效果好。上样浓度为3 mg/mL，上柱体积100 mL，上样流速为2 BV/h，60%浓度的洗脱剂乙醇溶液，2 BV/h的洗脱速率，洗脱体积为200 mL时可充分洗脱。在此条件下测得的串叶松香草黄酮浓度经纯化后由9.5%提高到22.4%。 （4）黄酮纯化：选用D101型树脂，吸附时间为2 h，吸附量为13.12 mg/g， pH为4黄酮纯化吸附效果好。上样浓度为3 mg/mL，上柱体积180 mL，上样流速为2 BV/h，80%浓度的洗脱剂乙醇溶液，2 BV/h的洗脱速率，洗脱体积为200 mL时可洗脱充分。在此条件下测得的串叶松香草黄酮浓度经纯化后由34.1%提高到45%。 （5）经UPLC-Triple-TOF/MS检测纯化后的串叶松香草多酚和黄酮冻干粉末混合体，确定串叶松香草中的多酚和黄酮主要含有10种成分及含量比例：Ⅰ新绿原酸（2.66%）、Ⅱ绿原酸（10.45%）、Ⅲ隐绿原酸（3.7%）、Ⅳ3-对香豆酰奎宁酸（1.38%）、Ⅴ异绿原酸B（0.91%）、Ⅵ异绿原酸C（2.27%）、Ⅶ山奈酚 3-O-呋喃芹糖基-吡喃鼠李糖-半乳糖苷（1.96%）、Ⅷ山奈酚3-O-吡喃鼠李糖（1-2）-半乳糖苷（3.32%）、Ⅸ山奈酚 3-O-吡喃鼠李糖（1-6）-半乳糖苷（3.09%）、Ⅹ紫云英苷（1.91%）。

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