反胶束溶液中的酶学性质研究

摘要

反胶束是分散于连续有机相中由表面活性剂所形成的稳定纳米尺度的聚集体。大多数酶在反胶束体系中能保持催化活性和稳定性,酶在反胶束中的性质和在水溶液中相比有一定的差别,近年来对于酶在反胶束中的催化性质的研究有了很大进展。酶分析法具有专一性、反应条件温和、灵敏度高等特点,是应用比较广泛的分析方法,本文将反胶束体系用于酶法分析,以反胶束固定化酶法测定微量组分。
　　第一章，概述反胶束溶液中的酶促反应机理以及反胶束体系的应用研究。
　　第二章，探讨将酶通过一定的方法固定于反胶束中,考察了含水量、表面活性剂浓度和助溶剂浓度以及水相pH值、离子强度对酶固载量的影响,确定了最适的固定化条件。
　　第三章，研究了LDH和ADH在反胶束体系中的催化性质,讨论了温度、pH值等因素对游离酶和固定化酶活力的影响,考查了固定化酶相对于游离酶荧光光谱的变化,试验了酶的米氏常数。催化动力学性质研究表明:游离和固定化LDH(CTAB-戊醇体系、CTAC-戊醇体系)的最适pH值为9.2、9.6、9.0,最适温度51℃、27℃、29℃;米氏常数15.4mmol/L、1.8mmol/L、1.6mmol/L,与游离酶相比,固定化LDH和ADH在CTAB-戊醇体系中的激发和发射波长均发生了蓝移,在CTAC-戊醇体系中激发和发射波长发生了红移。游离和固定化ADH(CTAB-戊醇体系、CTAC-戊醇体系)的最适pH值为8.0、8.6、8.0,最适温度33℃、21℃、25℃;米氏常数6.8mmol/L、5.1mmol/L、4.5mmol/L,试验了多种物质对ADH催化作用的影响,结果表明Cr(Ⅵ)对固定化ADH酶促反应有明显的抑制作用。
　　第四章，以反胶束固定化酶法测定微量组分,试验了酶促反应中各试剂的最佳用量以及pH值、温度等条件对酶促反应速度的影响,测定了试样中底物和抑制剂的含量。

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第一章 绪论

1.1 反胶束溶液中的酶催化反应机理

1.2 反胶束体系的应用

1.3本论文的主要内容

第二章 反胶束固定化酶的制备

2.1 引言

2.2实验部分

2.3结果与讨论

2.4结论

第三章 酶在反胶束溶液中的催化动力学性质

3.1引言

3.2实验部分

3.3结果与讨论

3.4结论

第四章 反胶束溶液在酶法测定中的应用

4.1 引言

4.2 实验部分

4.3 结果与讨论

全文总结

参考文献

致谢

附录 攻读硕士学位期间发表的论文