淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致小鼠免疫低下及生精障碍拮抗作用的实验研究

摘要

目的:本课题旨在通过环磷酰胺建立免疫低下和生精障碍模型,探讨淫羊藿总黄酮(TFE)的免疫调节作用及对生殖系统的保护作用。
　　方法:将 BalB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组。空白对照组腹腔注射生理盐水(NS),其余各组腹腔注射环磷酰胺建立相应模型。空白对照组和模型组灌胃1％CMC-Na,淫羊藿总黄酮低、中、高剂量组分别按照200mg/kg、400mg/kg、800mg/kg剂量灌胃淫羊藿总黄酮的CMC-Na溶液,连续给药35天。(1)通过测定各组小鼠脾脏重量、脾淋巴细胞绝对数量和相对数量、脾脏中总 T细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、B细胞、NK细胞的绝对数量以及骨髓有核细胞数量研究淫羊藿总黄酮的免疫调节作用。(2)通过测定各组小鼠睾丸重量、附睾重量、附睾精子密度、精子活率、各级生精细胞百分比、睾丸组织形态学变化、睾丸组织中SOD、GPX的活力、MDA的含量评价淫羊藿总黄酮对生精障碍小鼠生殖系统的保护作用,并通过检测睾丸组织中SOD和GPX基因的表达以及生精小管内生精细胞的凋亡和Bcl-2、Bax基因及蛋白的表达探讨淫羊藿总黄酮对生精障碍小鼠生殖系统的保护作用机理。
　　结果:(1)造模结束后,模型组小鼠脾淋巴细胞绝对数量、相对数量、骨髓有核细胞数量及脾脏中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+(B细胞)、CD3-CD49b+(NK细胞)细胞的绝对数量低于空白对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿总黄酮低剂量组小鼠脾淋巴细胞、骨髓有核细胞及脾脏中CD3+、CD8+、NK细胞绝对数量高于模型组,差异有统计学意义(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿总黄酮中剂量组小鼠脾脏中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK细胞及骨髓有核细胞绝对数量高于模型组,差异有统计学意义(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿总黄酮高剂量组小鼠脾淋巴细胞绝对数量、相对数量、骨髓有核细胞及脾脏中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK细胞的绝对数量高于模型组,差异有统计学意义(P﹤0.01或 P﹤0.05)。(2)造模结束后,模型组小鼠睾丸重量、附睾重量、精子密度、精子活率显著低于空白对照组,睾丸组织中各级生精细胞比例失调,形态学结构发生紊乱,生精小管内多见凋亡细胞, SOD、GPX的活力显著降低,MDA含量升高,睾丸组织中SOD2、SOD3、GPX1、Bcl-2 mRNA表达显著下调,Bax mRNA表达显著上调,Bcl-2/Bax蛋白表达比值下降,与空白组比较差异有统计学意义(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿总黄酮显著增加模型小鼠睾丸重量、附睾重量、精子密度和活率及睾丸内4N生精细胞的百分比,改善模型小鼠睾丸组织病理损伤,提高小鼠睾丸组织中SOD、GPX的活性、降低 MDA含量,上调 SOD3、GPX1、Bcl-2基因的表达,下调 Bax基因的表达,上升 Bcl-2/Bax蛋白表达的比例,与模型组比较差异有统计学意义(P﹤0.01或 P﹤0.05)。
　　结论:(1)淫羊藿总黄酮可显著调节环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能,其免疫调节的部分机制在于增加脾淋巴细胞绝对数量和相对数量,调节脾脏中T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞数量,并与促进骨髓有核细胞的增殖有关。(2)淫羊藿总黄酮可显著恢复环磷酰胺所致生精障碍小鼠的生殖功能,能够增加睾丸重量、附睾重量、精子密度、精子活率以及睾丸内4N生精细胞的百分比;清除睾丸组织中的氧自由基,提高睾丸组织中SOD、GPX的活性、降低 MDA含量;上调 SOD3、GPX1、Bcl-2基因的表达,降低 Bax基因的表达,提高 Bcl-2/Bax蛋白表达的比例,抑制生精细胞凋亡。

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英文缩略词表

引 言

材料与方法

1.1 材料

1.2 实验方法

结果

第一部分 淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用

第二部分 淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

讨论

小结

参考文献

综 述

参考文献

后 记

附录：攻读硕士学位期间发表的部分学术论著