养精胶囊对环磷酰胺致生精障碍模型小鼠生精功能的影响及机制研究

摘要

目的:观察养精胶囊对环磷酰胺(CP)致生精障碍模型小鼠生精功能的影响，并研究其机制。
　　方法:将36只8-9周龄的雄性BabL/c小鼠随机分为空白组、模型组、养精胶囊低、高剂量治疗组。采用每日腹腔注射环磷酰胺50mg/kg，连续7天的方法建立小鼠生精障碍模型。之后高、低浓度养精胶囊混悬液(1260mg/kg，630 mg/kg)连续灌胃30天治疗。治疗结束时，检测各组小鼠体重、精子密度、活力和畸形率、生殖器官脏器指数;HE染色光镜观察睾丸、附睾病理改变;放免法检测各组小鼠血清睾酮(T)水平;同时检测雄激素受体（AR）基因和蛋白表达情况。原末位标记法（TUNEL）测定生精细胞凋亡。Real-timePCR和western-blot法检测各组睾丸组织Bax、Bcl-2的表达。
　　结果:与空白对照组相比，模型组小鼠睾丸生精上皮明显变薄，生精细胞缺失明显，管腔中未见成熟精子;附睾管中精子密度降低，脱落生精细胞增多。模型组小鼠体重、睾丸和附睾脏器指数、精子密度和活力、血清睾酮水平、AR基因与蛋白的表达水平均显著降低。生精细胞的凋亡率、睾丸组织内Bax与Bcl-2基因和蛋白的表达值之比均明显升高。与模型组相比，养精胶囊低、高剂量组小鼠睾丸、附睾组织损伤明显改善。小鼠附睾指数、精子密度和精子活力、睾丸组织内AR基因与蛋白的表达水平显著增加。生精细胞的凋亡率、睾丸组织内bax与bcl-2基因和蛋白的表达值之比明显降低。
　　结论:养精胶囊能改善环磷酰胺所致小鼠的生精障碍。这一方面是与养精胶囊降低凋亡调控基因Bax/Bcl-2的表达比值而抑制生精细胞凋亡有关。另一方面与其显著上调AR的表达，增强T在精子发生中的作用相关。

目录

声明

摘要

前言

第一部分 理论研究

1．中医学对男性不育症的研究

1．1 中医学对男性不育症的认识沿革

1．2 现代中医对男性不育症的认识

2．补肾填精-治疗男性不育根本法则

2．1 理论基础

2．2 临床研究

2．3 基础实验研究

3．现代医学对男性不育的认识

3．1 男性不育的病因

3．2 生精障碍性不育的相关机制

3．3 治疗现状

第二部分 实验研究

1．实验材料

1．1 实验动物

1．2 主要试剂

1．3 主要的仪器设备

1．4 主要试剂的配制

2．实验方法

2．1 动物的造模及治疗处理

2．2 动物取材

2．3 附睾尾中精液分析

2．4 睾丸、附睾组织HE

2．5 睾丸生精细胞凋亡的检测

2．6 睾丸组织中Bax，Bcl-2表达的检测

2．7 血清睾酮的检测

2．8 睾丸组织中AR表达的检测

2．9 数据统计分析

3．实验结果

3．1 养精胶囊对生精障碍模型小鼠体重、生殖器官脏器指数的影响

3．2 养精胶囊对生精障碍模型小鼠精子浓度、活力、畸形率的影响

3．3 养精胶囊对生精障碍模型小鼠睾丸、附睾组织结构及生精小管损伤情况的影响

3．4 养精胶囊对生精障碍模型小鼠生精细胞凋亡的影响

3．5 养精胶囊对生精障碍模型小鼠睾丸组织中Bax和Bcl-2的表达影响

3．6 养精胶囊对生精障碍模型小鼠血清睾酮水平的影响

3．7 养精胶囊对生精障碍模型小鼠睾丸中AR基因及蛋白质的影响

第三部分 讨论

1．养精胶囊方药研究

1．1 中医配伍分析

1．2 现代药理研究

2．环磷酰胺造成生精障碍小鼠模型的评价

3．养精胶囊对环磷酰胺所致生精障碍小鼠的治疗作用

4．养精胶囊改善CP所致生精障碍模型小鼠生精功能的机制探讨

4．1 养精胶囊对模型小鼠生精细胞凋亡的影响

4．2 养精胶囊对模型小鼠睾酮和雄激素受体的影响

结语

参考文献

附录

攻读硕士学位期间取得的学术成果

致谢