心肌肥大反义基因治疗的基础研究——(p44/p42)MAPK反义寡核苷酸对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大反应的抑制作用和机理

摘要

心肌肥厚是导致心血管疾患发病率和死亡率增高的独立危险因素,是心力衰竟的前驱病变,基中心肌细胞肥大是肥厚心肌的最主要的病理改变,研究其发病和防治措施具有重要意义.结语:(1)AngⅡ处理可使培养心肌细胞蛋白合成和细胞直径增加;同时可提高MAPK活性和磷酸化(P44/P42)MAPK蛋白含量,以及c-fos和c-myc表达上调;(2)反义MAPK可抑制AngⅡ诱导的心肌肥大反应,同时AngⅡ活化MAPK和(p44/p42)MAPK以及上调c-fos和c-myc作用,均可被反义MAPK所阻;(3)反义MAPK可以同时阻断AngⅡ诱导的c-fos和c-myc两种转录因子的高表达.

目录

前言

材料与方法

1.仪器

2.新生大鼠细胞培养与生长指标测定

3.P81滤纸法测定MAPK活性

4.Western印迹法测定磷酸化(p44/p42)MAPK蛋白含量

5.Northern印迹法测定c-fos mRNA和c-myc mRNA的丰度

6.ODN脂质体转染法

7.实验分组和处理

8.统计方法

实验结果

1.AngⅡ对新生大鼠培养心肌细胞生长的促进作用

2.AngⅡ对培养心肌细胞MAPK活性及磷酸化(p44/p42)MAPK含量的影响

3.(p44/p42)MAPK反义ODN对AngⅡ诱导的培养心肌细胞肥大反应的抑制作用

4.(p44/p42)MAPK反义ODN可抑制AngⅡ对培养心肌细胞MAPK的激活效应

5.(p44/p42)MAPK反义ODN对AngⅡ诱导的培养心肌细胞c-fos mRNA和c-myc mRNA表达丰度的影响

6.c-myc反义ODN对AngⅡ诱导的培养心肌细胞c-fos mRNA和c-mycm RNA表达丰度的影响

讨论

小结

综述：心肌细胞生长调控

参考文献

致谢