寡糖亚硒酸酯的抗肿瘤活性研究

摘要

寡糖具有提高机体免疫力、抗肿瘤、促进有益菌繁殖等生物学功能，是当前研究热点之一。近年来，硒多糖作为抗肿瘤药物的研究已经比较多，而寡糖亚硒酸酯的抗肿瘤作用却很少报道。 本实验主要合成寡糖亚硒酸酯，并测定了其含硒量。从酯化工艺、反应条件方面加以改进，合成了性质稳定的寡糖亚硒酸酯。 实验结果显示，其含硒量高，超过15％，且水溶性好并通过紫外、红外光谱学对产物结构进行了分析和鉴定。 在生物学方面，采用Ames试验，测试了寡糖亚硒酸酯的抗诱变活性，并研究了其对体外培养的宫颈癌细胞（HeLa）的影响，结果显示，蔗糖亚硒酸酯和棉籽糖亚硒酸酯对宫颈癌细胞都具有显著的抑制作用，且比亚硒酸钠的效果要好。 另外，还对寡糖亚硒酸酯进行了动物活体实验，测试了小鼠肉瘤S180实体肿瘤的抑制率和对小鼠HeLa实体瘤的生命延长率测试，以及动物营养测试、急毒性测试。 数据显示，蔗糖亚硒酸酯的灌胃给药剂量为40mg/kg·d时，其实体肿瘤的抑制率达到87％，当腹腔注射剂量为1mg/kg·d时，生命可延长一倍以上； 棉籽糖亚硒酸酯的口服半致死量最高可达335mg/kg，当腹腔注射剂量为2mg/kg·d时，也可使荷瘤小鼠的生命延长一倍以上。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章综述

1硒元素的研究

1.1硒在人体内的存在形式

1.2硒的生物学功能

2含硒化合物的进展

3寡糖

3.1寡糖的来源及其获取方法

3.2寡糖的生物学功能

3.3棉籽糖

4本论文选题的内容、目的和意义

4.1本论文研究的目的与意义

4.2本论文研究的内容

第二章寡糖亚硒酸酯的合成与表征

1实验部分

1.1主要试剂

1.2主要仪器

2实验方法

1.1棉籽糖亚硒酸酯合成

1.2棉籽糖亚硒酸酯中硒含量的测定

3实验结果与表征

3.1棉籽糖亚硒酸酯样品含硒量的测定结果

3.2棉籽糖亚硒酸酯的结构表征与分析

4棉籽糖亚硒酸酯的稳定性

小结

第三章 寡糖亚硒酸醑的抗诱变研究

1实验材料与仪器

1.1材料

1.2主要试剂和溶液

1.3主要仪器

2实验方法(Ames法)

2.1 S-9的制备和S-9混合液的配制

2.2菌株的培养与鉴定

2.3 Ames试验方法与步骤

3实验结果与讨论

小结

第四章 动物对寡糖亚硒酸酯中硒元素吸收的实验研究

1实验材料与仪器

1.1实验材料

1.2实验仪器

2实验方法

2.1对动物血液中硒含量的测定

2.2对动物组织内硒含量的测定

2.3寡糖亚硒酸酯的急性毒性实验

3实验结果

3.1动物血液中硒的含量

3.2动物各组织中硒的含量

3.3对小鼠急性毒性测试实验结果与讨论

小结

第五章 寡糖亚硒酸酯诱导HeLa细胞凋亡的体外实验

1.实验材料与仪器

1.1实验材料

1.2实验仪器

2实验方法

2.1 RPMI-1640无菌培养液的配制步骤

2.2HeLa癌细胞株解冻方法

2.3细胞培养

2.4 MTT比色法

2.5形态学观察

3结果分析与讨论

3.1最佳细胞浓度的测定

3.2寡糖亚硒酸酯对HeLa癌细胞生长抑制作用

3.3寡糖亚硒酸酯与亚硒酸钠对癌细胞生长的抑制作用

3.4相差显微镜下凋亡小体观察结果

3.5荧光显微镜下凋亡小体观察结果

小结

第六章 寡糖亚硒酸酯对荷瘤小鼠的体内实验

1实验材料与仪器

1.1实验材料与试剂

1.2实验仪器

2实验方法

2.1肿瘤抑制率的测试方法与步骤

2.2荷瘤小鼠生命延长率的测试方法

3结果与讨论

3.1肿瘤抑制率的测试结果

3.2接种HeLa细胞株的小鼠生命延长率结果与讨论

小结

第七章全文总结

参考文献

附录

研究生在读期间研究成果

致谢