竹叶多糖提取、分离及检测技术研究

摘要

本研究以毛竹为研究对象，对竹叶多糖的提取、纯化、检测及活性进行研究，通过单因素试验和正交试验考察了温度、时间、固液比、提取次数对多糖提取率的影响，同时对水提取、超声波提取和微波提取三种提取方法进行了比较，利用葡聚糖凝胶和纤维素柱层析分离技术对多糖进行纯化，并运用薄层色谱和气相色谱考察了其单糖组成，采用高通量药物筛选模型对多糖的抗肿瘤活性进行了探讨，试验结果如下： 1.建立了苯酚-硫酸法测定竹叶多糖含量的方法。在波长为490nm，以无水葡萄糖为对照品，20～100μg/ml范围内，浓度和吸光度呈良好的线性关系，回归方程为Y=7.275X+0.0004，相关系数R2为0.9989. 2.优化了竹叶多糖提取工艺参数，首次将超声波和微波技术应用到竹叶多糖的提取工艺，得到其最佳提取条件，水提最佳浸提参数为：温度80℃，时间90min，固液比1∶25，浸提3次，多糖得率为0.661﹪；超声波提取最佳浸提参数为：温度70(℃，时间20min，固液比1∶20，浸提3次，多糖得率为0.708﹪；微波提取最佳浸提参数为：微波功率500W，固液比1∶15，时间2min，浸提3次，多糖得率为0.655﹪。 3.竹叶粗多糖经Sevag法脱蛋白，DEAE-纤维素柱层析，以浓度为0、0.05M、0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液梯度洗脱，得到四个竹叶多糖(Bamboopolysaccharide，BPS)：BPS1、BPS2、BPS3、BPS4，其得率分别为46.45﹪、4.31﹪、1.62﹪、0.53﹪；BPS1再经DEAE-纤维素、SephadexG-75凝胶柱层析得到BPS11；用SephadexG-100柱层析鉴定了它们的纯度，用HPTLC和GC测定了它们的单糖组成为：鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=2.91∶9.27∶4.42∶6.38∶25.59∶9.44。 4.运用高通量药物筛选模型对竹叶多糖的抗肿瘤活性进行了考察，结果表明，在竹叶多糖剂量为10μg/ml时，对THP-1(单核细胞白血病细胞株)肿瘤细胞有抑制作用。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章前言

第二章 竹叶多糖检测方法的研究

第三章 竹叶多糖提取工艺技术研究

第四章 竹叶多糖分离纯化技术研究

第五章竹叶多糖的理化性质及活性研究

总结

参考文献

附录

致谢

作者简介