一株高效苯酚降解菌的分离和鉴定及特性的研究

摘要

酚类化合物为细胞原浆毒物，属高毒性物质。这类物质来源广泛。通常污染水原，毒死鱼虾，危害农作物，并严重威胁人类的健康。含酚有机物的毒性还在于其只能被少数的微生物分解。从自然界中筛选分离出能够降解特定污染物的高效菌种，有针对性地投加到已有的污水处理系统中的生物强化技术，能够快速提供大量具有恃殊作用的微生物，在有毒有害污染物治理中显示出巨大的潜力。 本研究从污水处理厂的初级处理池中分离到一株高效苯酚降解菌JF－10，该菌能在以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基中生长，并在60小时内将1000mg／L苯酚完全降解，当培养基中添加有0.05％酵母粉时，完全降解的时间将被缩短到24小时。JF－10为革兰氏阴性菌，杆状，有运动性，葡萄糖发酵产酸，氧化酶阳性，过氧化氢酶阳性，硝酸盐还原阳性，具有典型假单胞菌属的鉴定特征。JF－10的16S rDNA序列与p.citronellolis、P.nitroreducens、P.aeruginosa和16S rDNA序列相似性分别为99％、97％、96％。gyrB基因序列分析和生理生化特征进一步表明，该菌可能是假单胞菌属的一个新种。 JF－10在pH为4.0－9.0时对苯酚的降解率达80％以上，pH为8.0时降解效率达最高。按重金属对苯酚降解的影响，可将其分为两组：Cd<'2+>、Co<'2+>对苯酚降解无促进作用；Mn<'2+>、Cu<'2+>、Ni<'2+>、Pb<'2+>在一定的浓度范围对苯酚的降解有促进作用。JF－10对重金属的敏感程度大小依次为：Co<'2+>、Cu<'2+>（最小完全抑制浓度0.5mg／1）>Ni<'2+>（最小完全抑制浓度1mg／1）>C<'2+>（最小完全抑制浓度2－5mg／1）>Mn<'2+>（最小完全抑制浓度25mg／1）>Pd<'2+>（最小完全抑制浓度>500mg／1）。JF－10还能利用对甲酚、邻苯二酚、苯甲酸钠，不能利用邻甲酚、α-萘酚、甲苯、苯胺，从它们对苯酚降解的影响来看：α－萘酚大于苯胺，而甲苯对苯酚降解没有影响。苯酚可能通过共代谢促进邻甲酚的降解。 JF－10的苯酚降解基因定位于染色体上，用一对保守引物，以JF－10的总DNA为模板，扩增得到600多个碱基的片段，该片段与Pseudomonas mendocina同源性92％，Pseudomonas putida菌株P－8同源性90％，Pseudomonas putida菌株KL3388％，以该片段为探针，为了得到含有整个苯酚降解基因簇，构建BAC文库。为菌种的遗传改造和基因工程菌的构建奠定了基础。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及学位论文使用授权书

1.前言

2.材料与方法

3.结果与分析

4.讨论

5.参考文献

6.致谢