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第一章文献综述
1牛白血病病毒与人类嗜T淋巴细胞病毒
2 EBL病原学研究
2.1病原分类
2.2 BLV形态特征
2.3 BLV化学组成
2.4 BLV基因结构特征
2.5 BLV对外界环境的抵抗力
3 EBL流行病学特征
3.1易感动物及潜伏期
3.2发病率和死亡率
4 EBL的传播
4.1分泌物传播
4.2接触性传播
4.3寄生昆虫引起的传播
4.4血源性传播
4.5乳源性传播
4.6精液和胚胎移殖传播
4.7胎盘传播
5 EBL临床症状和病理变化
5.1临床症状
5.2病理变化
6 EBL诊断方法研究进展
6.1血液学变化
6.2病原分离
6.3动物试验
6.4合胞体试验
6.5放射免疫测定法(radioimmunoassay,RIA)
6.6血清学诊断方法
6.7聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)
6.8 Western-blot
6.9 PCR-ELISA
7 EBL疫苗研究概况
8 EBL防治措施
8.1加强监测和检疫
8.2隔离饲养或淘汰
8.3消毒和灭蚊蝇
8.4培养健康牛群
8.5种公牛的管理和污染牛群犊牛的饲养
8.6对饲养人员的管理
第二章BLV gp51基因的克隆
1研究的目的和意义
2材料和方法
2.1试验材料
2.2主要溶液的配制
2.3主要仪器与设备
2.4试验方法
3结果
3.1 BLV gp51基因PCR扩增
3.2重组质粒的鉴定
3.3 BLV gp51基因的序列测定
3.4序列测定分析
4分析与讨论
4.1 BLV gp51基因的扩增
4.2 BLV gp51基因PCR扩增条件的优化
4.3 BLV gp51基因的克隆
5小结
第三章BLV gp51基因的原核表达与鉴定
1研究目的与意义
2材料与方法
2.1菌株与质粒
2.2主要试剂与试剂盒
2.3主要溶液的配制
2.4主要仪器与设备
2.5试验方法
3结果
3.1 gp51基因与pET-32a原核表达载体的连接
3.2重组gp51的表达
3.3重组蛋白的Western-blot检测
3.4重组蛋白的大量表达与纯化
4分析与讨论
4.1重组gp51蛋白的表达
4.2重组gp51蛋白的免疫学反应性
4.3重组gp51蛋白的纯化
5小结
第四章牛白血病gp51-ELISA抗体检测方法的建立及初步应用
1研究目的和意义
2材料与方法
2.1材料
2.2方法
3结果与分析
3.1抗原最佳包被浓度和阴阳性血清最佳稀释度的确定(方阵滴定)
3.2酶标二抗最佳工作浓度的确定
3.3封闭浓度的确定
3.4阴阳性血清最佳反应时间的确定
3.5酶标二抗的作用时间的确定
3.6底物作用时间的确定
3.7间接ELISA方法阴阳性临界值的确定
3.8特异性试验
3.9与现有试剂盒的比对试验
3.10血清样品ELISA检测结果
4讨论与结论
4.1讨论
4.2结论
参考文献
致谢