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缩略语表
1.前言
1.1 肥胖
1.1.1 肥胖发生
1.1.2 全基因组关联研究
1.1.3 全基因组关联研究与肥胖候选基因的筛选
1.2 FTO
1.2.1 FTO的发现及其生物学特征
1.2.2 FTO的表达调控
1.2.3 FTO基因多态性与肥胖的关系
1.2.4 FTO基因在模式动物猪中的研究概况
1.3 KLFs家族因子
1.3.1 KLF6与脂肪细胞分化
1.3.2 KLF15与脂肪细胞分化
1.4 线粒体
1.4.1 线粒体概述
1.4.2 线粒体与肥胖的关系
1.5 研究目的与意义
2.材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验用细胞系
2.1.2 实验用菌种与质粒
2.1.3 实验仪器
2.2 实验试剂与配制方法
2.2.1 实验试剂
2.2.2 部分实验试剂配制方法
2.3 实验方法
2.3.1 基因扩增与载体构建
2.3.2 RNA的提取、纯化与反转录
2.3.3 DNA的提取
2.3.4 实时荧光定量PCR
2.3.5 细胞培养与细胞转染
2.3.6 细胞甘油三酯和甘油的测定
2.3.7 双荧光素酶法测定启动子活性
2.3.8 流式细胞仪检测细胞线粒体数量
3.结果与分析
3.1 猪FTO基因启动子和全长CDS的扩增
3.2 猪FTO基因启动子的转录调控研究
3.2.1 猪FTO基因启动子活性分析
3.2.2 猪FTO基因启动子的顺式作用元件分析
3.2.3 猪FTO基因启动子功能分析
3.2.4 KLF6和KLF15对猪FTO基因启动子的转录调控
3.2.5 KLF6和KLF15对猪FTO基因启动子的位点依赖性
3.3 FTO基因对脂代谢的调控研究
3.3.1 FTO基因促进细胞内甘油三酯的积累、抑制甘油三酯的分解
3.3.2 FTO基因超表达对脂肪酸合成、脂肪酸氧化和脂滴相关蛋白基因的影响
3.3.3 FTO基因超表达下调线粒体数量
3.3.4 FTO对线粒体融合、分裂和生成相关基因表达的影响
4.讨论
5.结论与创新点
5.1 结论
5.2 创新点
参考文献
致谢