曲尼司特对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化影响的实验研究

摘要

第一部分曲尼司特对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化和左室功能的影响 目的:观察曲尼司特对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化和左室功能的影响。 方法:结扎大鼠冠状动脉制成急性心肌梗死模型，随机分成心肌梗死组8只、曲尼司特组(400mg.kg-1.d-1)7只和苯那普利组(10mg.kg-1.d-1)6只。另取假手术大鼠6只作为对照。于第4周末，用放免法测定血浆和心肌血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)，用氯胺T法测定羟脯氨酸含量，用免疫组化法测定Ⅰ/Ⅲ型胶原比值。动脉插管测定大鼠心功能。 结果:与假手术组大鼠相比，AMI组、曲尼司特组和苯那普利组大鼠SBP、DBP、LVSP明显下降(P均＜0.05)、左室内压最大上升和下降速率±dp/dt均明显下降(P＜0.01)，LVEDP、血浆和心肌ANGⅡ、心肌羟脯氨酸含量显著升高(P＜0.01)。Ⅰ/Ⅲ型胶原比值在AMI组明显升高，在曲尼司特组和苯那普利组变化不明显。与心肌梗死组大鼠相比，曲尼司特组大鼠血浆和心肌ANGⅡ水平无明显降低(P＞0.05)，非梗死区心肌羟脯氨酸含量、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值明显降低(P均＜0.05)，LVEDP明显降低(P＜0.01)，±dp/dt升高(P＜0.05)；苯那普利组血浆和心肌ANGⅡ水平、非梗死区心肌羟脯氨酸含量、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值明显降低(P均＜0.05)，LVEDP明显降低(P＜0.01)，±dp/dt明显升高(P＜0.05，P＜0.01)。苯那普利组与曲尼司特组相比，血浆和心肌ANGⅡ水平明显降低(P＜0.05，P＜0.01)，dp/dt明显升高(P＜0.05)。 结论:曲尼司特可以减轻急性心肌梗死大鼠的心肌纤维化，改善左室功能。 第二部分大鼠心肌梗死后肥大细胞的变化及其在心肌纤维化中的作用 目的:观察大鼠心肌梗死后肥大细胞及大鼠肥大细胞蛋白酶-1(RMCP-1)的变化，曲尼司特对它们的影响和它们在大鼠心肌梗死后心肌纤维化中的作用。 方法:结扎大鼠冠状动脉制成急性心肌梗死模型，随机分成心肌梗死组8只和曲尼司特组(400mg.kg-1.d-1)7只。另取假手术大鼠8只做为对照。于第4周末处死大鼠，用甲苯胺蓝染色检测心肌组织中肥大细胞数量，用RT-PCR检测RMCP-1基因的表达，用氯胺T法测定心肌羟脯氨酸含量。 结果:心肌梗死组大鼠心肌组织中肥大细胞数量[(7.90±2.20)个/mm2]、RMCP-1基因表达[RMCP-1/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)：0.79±0.19)]和心肌羟脯氨酸含量[(568.67±135.58)μg.g-1心肌]均较假手术组[(2.94±1.40)个/mm2，0.43±0.12，(338.51±88.26)μg.g-1心肌]明显升高(均为P＜0.01)。曲尼司特组大鼠肥大细胞数量[(5.12±2.42)个/mm2]、RMCP-1基因的表达(0.58±0.14)和心肌羟脯氨酸含量[(442.91±87.30)μg.g-1心肌]均较心肌梗死组大鼠明显降低(均为P＜0.05)；与假手术组大鼠相比，各指标均明显升高(均为P＜0.05)。 结论：在急性心肌梗死大鼠，心肌肥大细胞数及RMCP-1表达增加，它们在大鼠心肌梗死后心肌纤维化过程中可能起一定作用。曲尼司特能减少心肌肥大细胞数及RMCP-1的表达，这可能是其在心肌梗死以后抑制心肌纤维化的机制之一。 第三部分急性心肌梗死大鼠TGF-β1的变化及曲尼司特对其影响 目的：观察急性心肌梗死大鼠心肌TGF-β1mRNA和蛋白的表达，以及曲尼司特对其影响。 方法：结扎大鼠冠状动脉制成急性心肌梗死模型，随机分成心肌梗死组8只和曲尼司特组(400mg.kg-1.d-1)8只。另取假手术大鼠8只为对照。于第四周末处死大鼠，用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠心肌TGF-β1mRNA，用免疫印迹法(West-blotting)测定TGF-β1蛋白水平。 结果：心肌梗死组大鼠心肌组织TGF-β1mRNA水平[TGF-β1/GAPDH(0.87±0.30)]和蛋白水平[TGF-β1/β-actin(1.21±0.38)均较假手术组[TGF-β1/GAPDH(0.30±0.12)，TGF-β1/β-actin(0.44±0.14)]明显升高(均为P＜0.01)。曲尼司特组大鼠心肌组织TGF-β1mRNA水平[TGF-β1/GAPDH(0.54±0.22)]、蛋白水平[TGF-β1/β-actin(0.75±0.33)]均较心肌梗死组明显降低(均为P＜0.05)；但与假手术组相比，各指标均明显升高(均为P＜0.05)。 结论：曲尼司特能降低大鼠心肌梗死后心肌TGF-β1mRNA和蛋白的表达，这可能是其抑制心肌梗死后心肌纤维化的机制之一。

目录

前言

第一部分曲尼司特对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化和左室功能的影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分大鼠心肌梗死后肥大细胞的变化及其在心肌纤维化中的作用

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分急性心肌梗死大鼠转化生长因子-β1的变化及曲尼司特对其影响

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综述一曲尼司特的研究进展及其在心血管疾病中的应用

综述二肥大细胞与心肌纤维化的关系

缩略词表

附录：在校期间发表的论文

致谢