氯霉素分子印迹聚合物的制备及其在食品残留分析中的应用

摘要

分子印迹技术是近几年迅速发展起来的一项新技术。分子印迹聚合物（Molecularly Imprinted Polymer，MIP）具有选择性高、化学稳定性好等优点，是一种有发展潜力的固相萃取材料。MIP与固相萃取结合形成的分子印迹固相萃取技术（Molecularly Imprinted Solid-Phase Extraction，MISPE），在药物、食品及生物样品中物质的分离检测方面具有很好的应用前景。 氯霉素是（Chloramphenicol，CAP）一种广谱抗生素，常作为动物饲料添加剂使用。由于使用不当及代谢不完全，造成动物源性食品中的氯霉素残留，对人体存在严重的毒副作用，对人类健康造成威胁。食品中氯霉素残留的分析是食品安全检测的重要内容。由于食品中氯霉素含量较低，样品基体复杂，因此提高分析方法的选择性和灵敏度具有实际意义。固相萃取是一种常用提高选择性的方法，其关键是性能优良的固相萃取材料的制备。 本文以CAP为对象，制备对CAP具有特异识别性且高度稳定的CAP印迹聚合物（Chloramphenicol based Molecularly Imprinted Polymer，CAPMIP）。通过优化制备条件以及分子印迹固相萃取条件，实现了对饲料中CAP的检测。 本文主要工作结论包括： 1.以CAP为模板分子，MAA为功能单体，通过对模板分子与单体比例、聚合温度以及模板分子与交联剂比例等因素的优化，制备性能优良的CAPMIP。结果表明：模板分子、功能单体与交联剂比例为1:4:24，聚合温度为60℃，所制备的CAPMIP微粒的吸附效果最佳。 2.以制备的CAPMIP微粒作为固相萃取剂，优化活化、上样、淋洗和洗脱条件，得到优化的固相萃取条件为：5mL甲醇，5mL乙腈和5mL水活化MIP柱；2mL10％的乙醇水溶液为上样液；3mL20％乙腈水溶液为淋洗液；2mL乙腈为洗脱液。在此条件下对1～15μmoL/LCAP的回收率在74.3～96.7％之间。MISPE能选择性地识别和定量回收样品中的CAP。 3.亚临界水萃取与CAPMIP固相萃取联用，检测饲料中的CAP。CAP浓度为0.02、0.05、0.1μmoL/g加标饲料的回收率分别为76.6％，80.6％和84.8％。相对于单纯的亚临界水萃取，亚临界水萃取和MISPE萃取联用后HPLC检测时有更优的分离效果。