高氧对A549细胞Nrf2及其相关抗氧化酶表达影响的研究

摘要

目的：研究高氧对A549细胞Nrf2及其相关抗氧化酶HO-1和Gpx2表达的影响,探讨Nrf2在高氧肺损伤中的作用及机制。
　　方法：A549细胞体外培养,并随机分为空气组和高氧组,两组分别暴露于空气和95％的氧气中,分别于暴露0h,0.5h,6h,12h后在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态及形态学变化;CCK-8法检测细胞活性;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)染色流式细胞仪检测细胞内ROS水平;并通过实时荧光定量PCR测定A549细胞Nrf2、HO-1和Gpx2mRNA的表达。
　　结果：(1)与空气组比较,高氧暴露后A549细胞生长状态明显不良,悬浮细胞增多,细胞活性下降;(2)与空气组比较,高氧暴露0.5h后A549细胞内ROS生成明显增加;(3)与空气组比较,高氧暴露0.5h和6h后A549细胞Nrf2mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);(4)与空气组比较,高氧暴露0.5h后A549细胞HO-1mRNA表达无明显变化,差异无统计学意义,高氧暴露6h后HO-1mRNA表达显著增强,差异有统计学意义(P<0.05);(5)与空气组比较,高氧暴露0.5h和6h后A549细胞Gpx2mRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：高氧暴露导致A549细胞生长不良、活性进行性下降,同时细胞内ROS生成明显增加;高氧暴露可上调A549细胞Nrf2及其相关抗氧化酶HO-1和Gpx2mRNA的表达,提示内源性的Nrf2及其相关抗氧化酶HO-1和Gpx2可能在高氧肺损伤中起保护作用。

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