参考剂量双酚A对大鼠水迷宫行为影响的研究

摘要

目的：(1)模拟人群双酚A(bisphenol A,BPA)的慢性环境暴露，建立参考剂量双酚A的成年雄性大鼠慢性染毒模型，然后观察双酚A对模型大鼠及其子代的空间记忆行为的影响。(2)观察高脂饮食和双酚A对雄性大鼠空间记忆的联合作用，以及染料木黄酮对BPA记忆损害是否有保护作用。
　　方法：第一部分：选择22只60天龄的雄性Wistar大鼠（F0）随机分成对照组和BPA组，每组11只，分别接受玉米油溶剂和含50μg/kg bw/day双酚A（BPA）的玉米油干预10周。然后和未干预的发情期雌鼠进行交配。交配结束后约两周，所有父系大鼠进行Morris水迷宫（MWM）测试一周，随后立即处死，取脑组织和血清，分别检测海马乙酰胆碱酯酶（AChE）含量和血清游离双酚 A的水平。子代（F1）大鼠未接受任何干预，自然饲养至56天，然后和它们的父代一样进行水迷宫测试和海马乙酰胆碱酯酶的检测。所有实验动物均常规定期记录进食量和体重。第二部分：选择72只60天龄的雄性Wistar大鼠随机给予标准对照饲料(control, CD)或者高脂饲料(high-fat-diet,HFD)，同时接受0,50μg/kg bw/day BPA和/或0,10 mg/kg bw/day GEN干预20周。随后接受MWM空间记忆检测。
　　结果：第一部分：（1）对照组和BPA组F0代雄性大鼠每日进食量和体重的组间比较无显著性差异。（2）对照组和BPA组的孕鼠每日进食量和体重的组间比较无显著性差异。（3）对照组和BPA组的F1代出生性别比和窝重的比较无显著性差异。出生后0天至55天期间，雄性比雌性的每日进食量[F(9,324)=60.99, P<0.01]和体重要大[F(1,36)=216.50, P<0.01]，组间同性别比较无显著性差异。（4）F0代大鼠的水迷宫成绩：BPA组的游泳距离[F(1,20)=7.39, P=0.01]和逃避潜伏期[F(1，20)=5.88，P=0.03]均较对照组明显延长，游泳速度较对照组显著提高[F(1,20)=6.25，P=0.02]，而其跨平台次数[t(20)=4.57，P<0.01]和目标象限游泳时间[t(20)=4.41，P<0.01]均较对照组显著减少。（5）F0代大鼠海马AChE水平:BPA组海马AChE水平显著低于对照组[t(20)=2.71, P=0.01]。（6）F1代大鼠的水迷宫成绩：BPA组的F1代与对照组的F1代同性别组间比较，游泳距离[F(1，36)=51.73，P<0.01]和逃避潜伏期[F(1，36)=25.07，P<0.01]均显著延长，BPA组的F1代雌性较对照组的F1代雌性跨平台次数[t(18)=3.71，P<0.01]和目标象限游泳时间[t(18)=2.78，P=0.01]均显著减少；BPA组的F1代雌性比对照组的F1代雌性的游泳速度明显提高[F(1，18)=4.99，P=0.03]，BPA组F1代的雌性与雄性相比，其跨平台次数[t(18)=3.21，P<0.01]和目标象限游泳时间[t(18)=2.78，P=0.01]均显著减少，显示了性别差异性，而对照组无性别差异。（7）F1代大鼠的海马AChE:对照组F1代的雌性与雄性相比有较高水平的海马 AChE[t(18)=2.42, P=0.02]，显示了性别差异，而BPA组的F1代无性别差异。（8）F0代大鼠血清双酚A水平：对照组为1.88±0.34ng/ml，BPA组为12.71±2.35ng/ml，均在人群正常范围之内。
　　第二部分：在对照饲料组中：BPA和BPA+GEN组大鼠显示了较长的游泳距离和潜伏期以及较短的目标象限游泳时间,而GEN组大鼠和对照组比较无线组性差异（游泳距离：F(3,32)=8.27，P<0.01，潜伏期：F(3,32)=5.88，P<0.01），所有干预组的大鼠与对照组比较游泳速度显著提高[F(3,32)=3.41，P=0.03]。所有高脂饲料组的大鼠与标准饲料对照组的大鼠相比，一致性地显示了较长的游泳距离和潜伏期以及较短的目标象限游泳时间（所有P<0.01），除了有GEN干预的大鼠，其他高脂组的大鼠均显示了较快的游泳速度（均P=0.02）。
　　结论：参考剂量的BPA可以损害成年雄性大鼠的空间记忆能力，并且这种损害可以性别特异性的传给下一代。高脂饮食对成年雄性大鼠显示了和BPA同等的记忆损害和提高游泳速度的作用，但二者无联合效应；染料木黄酮对BPA和高脂饮食造成的记忆损害没有影响，但是在和高脂饮食共存的情况下染料木黄酮可以缓解游泳速度的提高。

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第一部分 父系大鼠参考剂量双酚A暴露对子代水迷宫行为影响的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

本研究的创新之处

参考文献

第二部分 慢性染料木黄酮干预对双酚A染毒雄性大鼠水迷宫行为的影响：高脂饮食的附加作用

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

本研究的创新之处

参考文献

综述

参考文献

致谢

附录