肾安提取液对大鼠残余肾模型TGF-βBMP-2 IGF-1影响的实验研究

摘要

目的:
　　 观察肾安提取液对大鼠残余肾(Residual kidney RK)模型钙磷代谢及骨密度的影响,并探讨其机制。
　　 方法:
　　 选用Wister大鼠40只大鼠行5/6肾脏切除术,并给予高磷饮水。造模成功后,分为模型组、骨化三醇组、肾安中剂量、肾安高剂量组,并设假手术组、正常组各10只。药物干预8周后,检测各组大鼠血BUN、Scr、磷(P3+)、血红蛋白、甲状旁腺激素(iPTH)、碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca2+),收集尿液测尿脱氧吡啶酚(DPD);8周后处死,取肾组织进行光镜、电镜病理分析;取双侧股骨,分别行TGF-β、IGF-1、BMP-2免疫组化和骨密度检测。
　　 结果:
　　 1.在药物干预第8周,模型组BUN、Scr、iPTH、ALP、P3+、尿DPD与正常组相比升高,而HGB、Ca2+降低;
　　 2.骨化三醇组BUN、Scr、HGB没有改善(与模型组比较:P＞0.05),而iPTH、ALP、P3+降低、Ca2+升高(均P＜0.05),尿DPD降低(P＜0.01);
　　 3.肾安高、中剂量能降低BUN、scr、iPTH、ALP、尿DPD、P3+(与模型组比较:均P＜0.05),HGB、Ca2+升高(与模型组比较:均P＜0.01);
　　 4.高中肾安剂量的BUN、Scr较骨化三醇组降低(均P＜0.01),HGB水平较D组升高(高剂量vs骨化三醇:P＜0.05;中剂量vs骨化三醇:P＜0.01);与骨化三醇比较,中剂量肾安iPTH、ALP、Ca2+、尿DPD水平没有差异(P＞0.05),但能降低P3+(P＜0.05)与水平;
　　 5.高肾安剂量组BUN、Scr、Ca2+与骨化三醇组相比降低(P＜0.01),而HGB、iPTH、ALP、P3+、尿DPD升高(P＜0.05);
　　 6.高肾安剂量组BUN、Scr、iPTH、ALP及尿DPD与肾安中剂量组相比增高(P＜0.01),血P3+升高(P＜0.05),HGB,Ca2+降低(P＜0.05).
　　 7.肾脏病理观察模型组肾小球肥大,系膜基质增生,肾小球硬化,血管腔闭塞;电镜下见足突广泛融合,内质网及胞浆内线粒体肿胀,细胞核变形皱缩甚至碎裂。以上病理改变骨化三醇组较模型组减轻,高中剂量肾安组更轻。
　　 8.模型组与正常组相比股骨中IGF-1、TGF-β、BMP-2的蛋白表达均明显降低(均P＜0.01);骨化三醇治疗后能明显升高IGF-1、BMP-2的表达(与模型组比较:均P＜0.01),但对TGF-β升高不显著(与模型组比较:P＞0.05);中剂量组IGF-1、TGF-β、BMP-2的蛋白表达均明显升高(与模型组比较:均P＜0.01);高剂量组IGF-1、TGF-β、BMP-2的蛋白表达均明显升高(与模型组比较:均P＜0.01);中高剂量组IGF-1、TGF-β、BMP-2的蛋白表达均高于骨化三醇组(均P＜0.05);高剂量组IGF-1、TGF-β、BMP-2的蛋白表达均明显降低中剂量组(均P＜0.05)。
　　 9.模型组骨密度水平下降(与正常组比:P＜0.01);三治疗组与模型组相比增强(P＜0.01);中剂量组骨密度水平较骨化三醇组增强(P＜0.05);高剂量组与骨化三醇组相比降低(P＞0.05)。
　　 结论:
　　 肾安提取液可升高大鼠RK模型的血钙,降低血磷、ALP及iPTH水平,提高骨密度,而这可能与肾安提取液改善肾功能,延缓CRF的进展,提高骨质中的TGF-β蛋白的表达,促进BMP-2及IGF-1的成骨作用有关。