植物乳杆菌产胞外多糖的研究

摘要

乳酸菌胞外多糖(EPS)是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的一种糖类化合物。在食品发酵过程中，由乳酸菌生产的EPS能提高乳制品的粘度和组织状态，因此被广泛应用于稳定剂、凝胶剂和增稠剂。
　　 本论文介绍了有关EPS的国内外研究进展，对乳酸菌EPS的生理功能、影响其产量的因素和应用进行了综述；然后对植物乳杆菌产生的EPS进行了发酵条件的优化、分离纯化和成分分析。
　　 利用单因素试验研究了葡萄糖、硫酸锰、蛋白胨的添加量，接种量、pH值、发酵时间、发酵温度对植物乳杆菌产EPS的影响。用部分因子分析法筛选对EPS产量影响显著的因子。发现葡萄糖添加量、pH值、发酵时间对EPS的产生影响显著。用Box-Behnken设计确定最佳培养条件：葡萄糖添加量为4.68％、硫酸锰0.006％、蛋白胨1％、接种量3％、pH值为6.32、发酵时间为27.51h、发酵温度30℃。EPS产量比优化前提高了约1.5倍。
　　 为了提高EPS的提取率，对EPS的提取工艺进行优化。优化结果表明最佳提取工艺为：采用3倍体积的无水乙醇来沉降EPS。Sevage法脱蛋白2次，Sevage液体积是发酵上清液2倍时脱蛋白效果最佳。蛋白质脱除率达到89.51％，EPS损失率为18.12％。将粗多糖用DEAE-52离子交换层析进一步纯化。
　　 对EPS进行定性分析，薄层层析法确定EPS是由鼠李糖、甘露糖和葡萄糖组成的。红外光谱分析结果显示样品为典型的多糖。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章 绪论

1.1多糖概述

1.2乳酸菌EPS的研究现状

1.3 EPS的分离纯化

1.3.1 EPS纯化时蛋白的去除

1.3.2凝胶层析法分离纯化EPS

1.4 EPS的检测技术

1.4.1薄层层析法测定EPS的单糖组成

1.4.2高效液相色谱法测定EPS的分子量

1.5影响乳酸菌EPS生物合成的因素

1.5.1培养基的组成

1.5.2温度

1.5.3发酵时间

1.5.4培养基pH值

1.6乳酸菌EPS的生理活性

1.6.1对菌体的保护作用

1.6.2抗肿瘤作用

1.6.3免疫调节作用

1.7乳酸菌EPS的应用

1.7.1乳酸菌EPS对酸乳粘度的影响

1.7.2乳酸菌EPS对酸乳保水性的影响

1.7.3乳酸菌EPS在干酪中的应用

1.8本课题研究的目的与意义

第2章 植物乳杆菌产EPS条件的优化

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果与分析

2.2.1葡萄糖标准曲线

2.2.2单因素对植物乳杆菌产EPS的影响

2.2.3发酵条件显著因子的筛选

2.2.4最陡爬坡实验

2.2.5 Box-Behnken试验结果

2.3本章小结

第3章 植物乳杆菌产EPS提取工艺的优化

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果与分析

3.2.1考马斯亮蓝G-250比色法蛋白标准曲线

3.2.2三种脱蛋白方法比较结果

3.2.3 Sevage法优化结果

3.2.4乙醇添加量对粗多糖提取的影响

3.2.5 DEAE-52离子交换柱分离纯化EPS

3.3本章小结

第4章 植物乳杆菌EPS的鉴定

4.1材料与方法

4.1.1材料

4.1.2方法

4.2结果与分析

4.2.1红外光谱分析结果

4.2.2薄层层析分析结果

4.3本章小结

第5章 结论和展望

5.1结论

5.2存在的问题和展望

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文