四君子汤与5-FU合用诱导人胃癌细胞凋亡及其机理的实验研究

摘要

目的：研究经典复方四君子汤与5-FU合用诱导胃癌细胞凋亡的作用及其机理。 方法：采用中药血清药理学和体外细胞培养的实验方法，用四君子汤的含药血清和稀释的5-FU溶液作用于人胃癌细胞(SGC-7901细胞株)后，通过倒置显微镜来观察细胞形态改变，用MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞的凋亡指数；并以免疫组化法来检测两药合用对人胃癌细胞凋亡相关基因(p53、Bcl-2和Bax)表达的影响。同时，对四君子汤含药血清的主要成分进行检测。 结果：四君子汤含药血清与5-FU联合应用能抑制人胃癌细胞SGC-7901生长，10％的低剂量、中剂量和高剂量血清分别与5-FU合用组的24小时抑制率分别为35.49％、43.45％、50.36％，具有剂量依赖性。倒置显微镜观察发现，经两药共同作用后，胃癌细胞SGC-7901变小、变圆，悬浮于培养液中，胞浆透明度下降，胞膜完整，颗粒感、折光性增强，以高剂量合用组最为明显。流式细胞仪PI单染色法检测细胞周期显示，5-FU对SGC-7901细胞具有G1/S期阻滞作用；高剂量血清与5-FU合用具有明显的S期阻滞作用，而其他组细胞周期分布较对照组而言变化不是很明显。AV/PI双染色法计数显示低、中、高剂量血清与5-FU合用作用细胞8小时和24小时后，细胞凋亡指数分别与对照组比较有显著性差异，且较两种药单独使用时的作用显著增强，且随剂量的加大作用愈强。四君子汤含药血清与5-FU合用作用于SGC-7901后能明显下调Bcl-2的表达，上调Bax的表达，对p53表达没有显著性影响。高效液相色谱法定性检测到四君子汤高剂量含药血清中含有人参皂苷Rg1。 结论：四君子汤与5-FU合用能诱导体外培养的人胃癌细胞SGC-7901凋亡，作用强于单用组。其作用机理可能与下调Bcl-2的表达，上调Bax的表达有关，而非依赖于p53途径。该实验为临床上中西医结合治疗胃癌提供理论依据。

目录

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材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

*文献综述*三氧化二砷抗肿瘤作用及其机理的研究现状和展望

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