四君子汤与氟尿嘧啶合用诱导肿瘤细胞凋亡及其机理研究

摘要

目的：探索经典复方四君子汤与5-FU合用对体外培养的人肝癌和结肠癌细胞的生长、凋亡以及相关基因表达的影响，并阐明其作用机理，为临床上两药合用治疗肝癌和结肠癌等消化系统肿瘤提供实验依据。 方法：将体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和结肠癌HT一29细胞分别分成生理盐水组、大剂量四君子汤组、中剂量四君子汤组、小剂量四君子汤组、5-FU组、大剂量四君汤加5-FU组、中剂量四君汤加5-FU组和小剂量四君汤加5-FU组，共8个组。将四君子汤含药血清和5-FU按各组所需的剂量加入到细胞培养瓶中，分别作用于人肝癌Bel-7402细胞和结肠癌HT-29细胞8h或24h。通过倒置显微镜观察各组细胞的形态改变；应用基于酶标仪的MTT法计算出不同浓度、作用时间的药物对细胞的生长抑制率，分析其对细胞增殖的影响；用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期变化；用免疫组化法检测两药合用对细胞凋亡相关基因(p53,、Bcl-2和Bax)表达的影响。 结果：四君子汤含药血清与5-FU作用于人肝癌细胞和结肠癌细胞后，光镜下可见癌细胞出现凋亡的形态改变；MTT法检测结果显示两药合用能明显抑制细胞增殖；流式细胞仪检测发现小、中、大剂量两药合用作用细胞24h后，肝癌细胞凋亡率为11.75％、18.92％、51.98％，结肠癌细胞凋亡率为20.13％、43.26％、53.27％，故其作用呈现剂量依赖性。通过细胞周期分析，两药合用能阻滞细胞G1/S期，随作用时间的延长，凋亡率增加；免疫组化法的检测结果显示，两药合用后两种癌细胞的p53,、Bcl-2和Bax基因，结果细胞着色。 结论：四君子汤与5一FU合用对体外培养的人肝癌Bel-7402细胞和结肠癌HT-29细胞的生长与增殖产生明显的抑制作用，可将细胞阻滞于G1/S期；同时，两药合用对体外培养的人肝癌和结肠癌细胞的凋亡产生明显的诱导作用，其作用机理可能与p53、Bcl-2、Bax等凋亡相关基因表达增强或减弱有关。

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结论

参考文献

综述 四君子汤及其组方药抗肿瘤作用机理的研究进展

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