四君子汤诱导人胃癌细胞凋亡的作用及其机制研究

摘要

目的：研究健脾益气的经典复方四君子汤对人胃癌细胞凋亡的诱导作用及其机制。rn 方法：采用中药血清药理学和体外细胞培养的实验方法，用含四君子汤中药血清处理人胃癌细胞(SCC-7901)后，通过电子显微镜、HE染色观察细胞形态改变，MTT法测定肿瘤细胞生长抑瘤率，流式细胞仪检测细胞周期分布、细胞凋亡指数；并以免疫组化法检测四君子汤对人胃癌细胞凋亡相关基因。p53、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。rn 结果：四君子汤中药血清能抑制人胃癌细胞SGC-7901生长，10％24h、10％48h、20％24h、20％48h组的抑瘤率分别为38.1％、44.3％、49.2％、54.896，具有时间和浓度依赖性。含10％和20％浓度的四君子汤中药血清作用于SGC-7901细胞24小时，HE染色可看到较为典型的细胞凋亡形态学变化：细胞体积缩小，细胞核固缩，染色质凝集，呈新月型紧贴于核膜周边等，电镜下还可清楚地看到凋亡小体形成。流式细胞仪细胞周期检测可在DNA直方图上看到典型的亚二倍体“凋亡峰”，而在对照组未见明显的细胞凋亡峰形成；流式细胞仪计数显示10％24h、10％48h、20％24h、20％48h组的细胞凋亡指数分别为13.8％、19.0％、19.9％、21.2％，与对照组比较有显著性差异；大部分细胞被阻滞于G0/G1期。四君子汤中药血清作用SGC-7901后能明显下调Bel-2的表达，上调Bax的表达，对p53的表达没有显著性影响。rn 结论：四君子汤能抑制体外培养的人胃癌细胞SGC-7901的生长，干扰细胞增殖周期，诱导细胞凋亡，其作用机制可能与下调Bcl-2的表达，上调Bax的表达有关，而非依赖p53途径。该实验为临床应用四君子汤防治胃癌提供了理论依据。