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黄柏花粉酸性多糖结构表征及对辐射诱导氧化应激的防护

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摘 要

Abstract

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Contents

第1章 绪论

1.1 课题背景及研究目的和意义

1.2 电离辐射对机体的损伤及其防护机制

1.2.1 电离辐射对机体的损伤

1.2.2 电离辐射的防护

1.2.3 电离辐射防护剂

1.3 花粉功效及成分特点

1.3.1 花粉的生物活性成分

1.3.2 黄柏的生物学功能

1.3.3 花粉的生物学功能

1.4 多糖类物质生物学功能及其构效关系

1.4.1 多糖的生物学功能

1.4.2 多糖的结构与功能的关系

1.5 多糖的提取、分离纯化及结构表征

1.5.1 多糖的提取方法

1.5.2 多糖的分离纯化

1.5.3 多糖的结构表征

1.6 本论文的主要研究内容

第2章 实验材料与方法

2.1 实验材料与仪器设备

2.1.1 实验原料

2.1.2 实验试剂与药品

2.1.3 仪器与设备

2.2花粉提取物的制备方法

2.2.1 原料预处理

2.2.2 花粉提取物的制备

2.2.3 花粉多糖的制备

2.3 花粉成分分析

2.3.1 多糖含量测定方法

2.3.2 蛋白含量测定方法

2.3.3 多酚含量测定方法

2.3.4 黄酮含量的测定方法

2.3.5 糖醛酸含量的测定方法

2.4 抗氧化能力测定方法

2.4.1 清除DPPH自由基能力的测定方法

2.4.2 清除超氧阴离子的测定方法

2.4.3 清除羟基自由基能力的测定方法

2.4.4 铁离子还原能力的测定方法

2.4.5 花粉多糖对辐射条件下细胞存活率的影响

2.5 黄柏花粉酸性多糖超声辅助提取工艺参数优化

2.5.1 超声辅助提取单因素试验方法

2.5.2 响应面法对黄柏花粉酸性多糖提取条件优化

2.6 黄柏花粉酸性多糖纯化

2.6.1一级脱杂纯化方法

2.6.2 二级柱层析纯化方法

2.7 黄柏花粉酸性多糖的结构表征

2.7.1 红外光谱分析

2.7.2 单糖组成分析

2.7.3 分子量测定

2.7.4 高碘酸氧化和Smith降解

2.7.5 甲基化分析

2.7.6 NMR光谱

2.8 黄柏花粉酸性多糖物性测定

2.8.1 流变学测定

2.8.2 DSC-衍射测定

2.8.3 X-衍射测定

2.8.4 AFM测定

2.9 黄柏花粉酸性多糖对辐射诱导小鼠氧化损伤的防护作用

2.9.1 实验动物的饲养及分组

2.9.2 辐射损伤模型建立

2.9.3 小鼠免疫指标测定

2.9.4 小鼠脾细胞凋亡测定

2.9.5 小鼠体内抗氧化酶指标测定

2.9.6 Western blot分析测定

2.9.7 免疫组化分析测定

2.10 数据统计及处理

第3章 花粉抗氧化活性成分筛选及分析

3.1 不同花粉提取物抗氧化能力分析

3.1.1 不同花粉提取物对DPPH自由基的清除活性

3.1.2 不同花粉提取物对超氧阴离子的清除活性

3.1.3 不同花粉提取物对羟自由基的清除活性

3.1.4 不同花粉提取物清除自由基的IC50值比较

3.1.5 不同花粉提取物的铁离子还原能力

3.2 不同花粉提取物活性成分含量及与抗氧化能力相关性分析

3.2.1 不同花粉提取物中活性成分的含量分析

3.2.2 不同花粉提取物成分含量与抗氧化能力相关性分析

3.3 不同pH特性的PARPP成分含量分析

3.4 不同pH特性的PARPP抗氧化能力比较

3.4.1 羟自由基清除能力比较

3.4.2 铁离子还原能力比较

3.5 不同pH特性的PARPP对辐射条件下细胞存活率的影响

3.5.1 对辐射条件下脾细胞存活率的影响

3.5.2 对辐射条件下内皮细胞存活率的影响

3.6 本章小结

第4章 黄柏花粉酸性多糖分离纯化工艺参数优化

4.1 超声辅提取黄柏花粉酸性多糖的工艺条件优化

4.1.1 超声辅助提取黄柏花粉酸性多糖单因素条件的确定

4.1.2 响应面法优化黄柏花粉酸性多糖提取工艺

4.2 黄柏花粉酸性多糖的纯化

4.2.1 一级脱杂纯化的工艺参数优化

4.2.2 二级柱层析纯化的工艺参数优化

4.3 本章小结

第5章 黄柏花粉酸性多糖结构表征及物性特征

5.1 黄柏花粉酸性多糖的结构表征

5.1.1 AC-PARPP-3 的FT-IR光谱分析

5.1.2 AC-PARPP-3 的分子量测定

5.1.3 AC-PARPP-3 的单糖组成分析

5.1.4 AC-PARPP-3 的高碘酸氧化和Smith降解

5.1.5 AC-PARPP-3 的甲基化分析

5.1.6 AC-PARPP-3 的核磁分析

5.2 黄柏花粉酸性多糖的物性特征

5.2.1黄柏花粉酸性多糖的流变学特性

5.2.2 黄柏花粉酸性多糖的DSC分析

5.3 黄柏花粉酸性多糖的高级结构特征

5.3.1 黄柏花粉酸性多糖的X衍射分析

5.3.2黄柏花粉酸性多糖的AMF分析

5.4 本章小结

第6章 黄柏花粉酸性多糖对辐射诱导小鼠氧化应激的防护

6.1 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠体征的影响

6.1.1 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠体重的影响

6.1.2 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠器官指数的影响

6.2 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠外周血损伤的防护作用

6.3 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠巨噬细胞吞噬指数的影响

6.4 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠抗氧化系统的影响

6.4.1 黄柏花粉酸性多糖对小鼠SOD活性的影响

6.4.2 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠GSH-Px活性的影响

6.4.3 黄柏花粉酸性多糖对小鼠CAT活性的影响

6.4.4 黄柏花粉酸性多糖对小鼠MDA活性的影响

6.5 黄柏花粉酸性多糖对辐射诱导氧化应激防护作用的机制

6.5.1 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠脾脏HE染色的影响

6.5.2 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠脾细胞凋亡的影响

6.5.3 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠细胞因子分泌的影响

6.5.4 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠脾脏蛋白激酶表达的影响

6.5.5 黄柏花粉酸性多糖对辐射小鼠脾细胞凋亡蛋白表达的影响

6.6 黄柏花粉酸性多糖对辐射诱导氧化应激防护作用的机制

6.7 本章小结

结 论

创新点

展望

参考文献

附录 1

附录 2

攻读博士学位期间发表的论文及其它成果

哈尔滨工业大学学位论文原创性声明和使用权限

致 谢

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