不同泌乳期中国汉族人乳磷脂组学及脂肪酸分析

摘要

人乳是新生儿和婴儿最佳的营养来源，它既保证了他们大部分的能量供给，又为其生长发育提供了必需的物质保障。约占人乳3％～5％的脂质是人乳中主要的能量物质，其中多种组分对婴儿的生长发育有积极作用。比如磷脂，约占人乳中总脂质的0.5％～1.0％，是除了甘油三酯之外的人乳脂质中的重要组分之一。附着于乳脂质球膜上的磷脂不仅可以保持脂质在人乳中的稳定性，而且在细胞信号传导和婴儿智力发育方面也起着重要作用。脂质组学是研究生物体内所有脂质分子特性，以及他们在蛋白表达及基因表达中的作用的一门新兴学科。其研究内容包括脂质及其代谢物的分析鉴定、脂质功能和代谢调控、脂质代谢网络及途径。本研究借助脂质组学的分析方法，对不同泌乳期人乳磷脂和脂肪酸进行定性和相对定量分析，为中国人乳磷脂组学和脂肪酸的研究提供参考。
　　本研究从哈尔滨（黑龙江省）、齐齐哈尔（黑龙江省）和吉林（吉林省）地区采集到汉族人的初乳(1～5 d)、过渡乳(6～20 d)和成熟乳(21～d)共计73份。采用超高效液相色谱联用质谱(UPLC-Triple-TOF-MS/MS)分析乳中磷脂，借助LipidView1.2检索磷脂分子式，PeakView2.2及其插件MasterViewTM1.1用于磷脂定性分析，MultiQuantTM用于磷脂相对定量分析（基于色谱峰面积）。同时，采用气相色谱法(GC-FID)分析了人乳脂质及其极性脂质中的脂肪酸组成，实现了对人乳脂质和极性脂质中脂肪酸组成情况的比较和不同泌乳期中脂肪酸含量动态变化趋势的分析。
　　结果显示，人乳中检出磷脂共计62种。其中，磷脂酰胆碱(PC)19种，磷脂酰乙醇胺(PE)25种，磷脂酰丝氨酸(PS)4种，磷脂酰肌醇(PI)5种，鞘磷脂(SM)9种。磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、鞘磷脂(SM)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰肌醇(PI)在总磷脂中的相对含量分别为38.12％、26.97％、29.54％、4.43％和0.94％，各种磷脂的相对含量随泌乳期变化表现出不同的变化趋势，但大多数磷脂的相对含量差异并不显著。另外，从人乳脂质及其极性脂质中分析得到脂肪酸各27种，但是脂肪酸的具体组成以及同种脂肪酸在人乳脂质和极性脂质中的相对含量差异显著。随着泌乳期的变化，人乳中饱和脂肪酸的相对含量在过渡乳中最高，达到了39.02％;单不饱和脂肪酸的相对含量在整个泌乳期中差异并不显著;多不饱和脂肪酸从过渡乳的24.91％升高到成熟期的29.05％，但其相对含量在初乳期和过渡期差异并不显著。
　　综上所述，本研究运用了脂质组学的手段对人乳中磷脂进行了定性和相对定量分析，为人乳磷脂组学的研究提供了数据参考。在人乳脂质及其极性脂质中，脂肪酸的具体组成差异较大;即使是在两种脂质中都被检测到的同一种脂肪酸，它们的相对含量差异也十分显著。人乳中各脂肪酸的相对含量随泌乳期变化明显，应在婴幼儿配方奶粉生产中予以重点关注。

目录

声明

摘要

1 引言

1．1 人乳概述

1．2 乳脂质概述

1．3 磷脂概述

1．3．1 磷脂的定义及分类

1．3．2 人乳中磷脂的特点

1．4 人乳脂肪酸概述

1．4．1 脂肪酸的定义

1．4．2 脂肪酸的分类

1．4．3 人乳中脂肪酸的特点

1．5 脂质组学

1．5．1 脂质组学概念及内容

1．5．2 脂质组学分析方法

1．5．3 脂质组学常用数据库

1．5．4 人乳中磷脂组学及脂肪酸的研究进展

1．6 研究目的和意义

1．7 研究内容

2 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 实验样品

2．1．2 实验试剂

2．1．3 实验仪器

2．2 方法

2．2．1 磷脂组学分析

2．2．2 人乳中脂肪酸分析

2．2．3 极性脂质中脂肪酸的分析

2．3 统计分析

3 结果与分析

3．1 中国人乳中磷脂组学的分析

3．1．1 磷脂组学分析的方法验证

3．1．2 人乳中磷脂的定性分析

3．1．3 人乳中磷脂的相对定量分析

3．2 极性脂质和人乳中的脂肪酸分析

3．2．1 气相色谱条件验证

3．2．2 极性脂质和人乳中脂肪酸的分布状况

3．2．3 人乳中脂肪酸随泌乳期的动态变化

4 讨论

4．1 人乳中磷脂组学分析的液质条件优化

4．2 中国人乳(东北地区)磷脂的分析

4．2．1 人乳中的磷脂组成

4．2．2 人乳中磷脂的相对定量分析

4．2．3 人乳中磷脂的动态变化

4．2．4 人乳中磷脂分析与脂质组学的发展

4．3 脂肪酸分析的气相色谱条件优化

4．4 人乳及极性脂质中脂肪酸分析

4．4．1 中国(东北地区)人乳及其极性脂质中的脂肪酸组成

4．4．2 中国(东北地区)人乳中脂肪酸的动态变化

4．4．3 人乳中脂肪酸的动态变化与婴儿个性化营养

5 结论

致谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术成果