声明
摘要
1引言
1．1阿维菌素毒理学研究进展
1．1．1阿维菌素类药物的环境残留
1．1．2阿维菌素的毒害作用
1．1．3阿维菌素毒理学机制的研究进展
1．2中性粒细胞外诱捕网研究进展
1．2．1中性粒细胞外诱捕网的生理、病理作用
1．2．2中性粒细胞外诱捕网的形成机理
1．2．3有害物质对中性粒细胞外诱捕网生成的影响
1．3研究的目的与意义
2材料与方法
2．1主要仪器与试剂
2．1．1主要仪器
2．1．2主要试剂
2．2试验方法
2．2．1鲤鱼中性粒细胞原代分离培养、鉴定及处理
2．2．2 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞活性影响的检测方法
2．2．3 AVM与MBD2分子的对接研究
2．2．4鲤鱼NETs释放和形态结构观察
2．2．5鲤鱼NETs释放定量检测
2．2．6实时荧光定量PCR法检测目的基因mRNA表达水平
2．2．7蛋白免疫印迹法检测目的蛋白表达水平
2．2．8 MassArray甲基化检测
2．2．9鲤鱼中性粒细胞呼吸爆发水平检测
2．3试验数据的分析与统计
3结果与分析
3．1 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞活力影响的检测结果
3．3 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞DNMTs mRNA和MBD2 mRNA及蛋白表达影响的检测结果
3．4 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞NETs释放影响的检测结果
3．4．1 SYTOX Green-Hoechst双荧光染色检测结果
3．4．2中性粒细胞和NETs扫描电镜观察结果
3．4．3 NETs释放定量检测结果
3．4．4 MPO mRNA和蛋白水平检测结果
3．5 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞呼吸爆发影响的检测结果
3．6 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞中PTEN表达和启动子区去甲基化程度影响的检测结果
3．6．1 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞PTEN表达影响的检测结果
3．6．2 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞PTEN启动子区去甲基化程度影响的检测结果
3．7 AVM急性暴露对鲤鱼中性粒细胞中PI3K-ERK通路调控的检测结果
4讨论
4．1 AVM急性暴露对NETs释放的影响
4．2 AVM急性暴露对DNA甲基化调控酶表达的影响
4．3 AVM急性暴露对PTEN表达及启动子去甲基化状态的影响
4．4 AVM急性暴露对NETs释放通路指标表达的影响
4．5 AVM急性暴露对中性粒细胞呼吸爆发水平的影响
5结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
