垂花百合组织培养及试管鳞茎膨大初步研究

摘要

垂花百合(Lilium cernum Komar.)，为百合科百合属多年生草本植物，主要分布于我国吉林长白山区。具有良好的观赏价值及较强抗性，是育种的重要种质资源。本试验以垂花百合的鳞片、无菌苗叶片、花器官为外植体建立了组织培养再生体系；探讨了不同浓度活性炭及多效唑对垂花百合试管鳞茎膨大的影响，对多效唑处理期间的试管鳞茎中内源激素含量的变化进行了研究，以期为垂花百合引种驯化及试管微鳞茎的工厂化生产提供理论依据及关键技术。主要研究结果如下：
　　 1．以垂花百合鳞片为外植体建立了组培快繁体系。结果表明：中层鳞片最适合做外植体诱导不定芽；鳞片分化率及分化系数在MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L培养基上最高达46.7％及4.71; MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L为最适增殖培养基，增值系数最高达6.57;最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.3mg/L+AC0.5g/L，生根率最高达70.0%，平均根长达1.82cm。
　　 2．以无菌苗叶片为外植体建立了再生体系。无菌苗叶片不定芽的诱导率：叶片基部最高，中部次之，顶部几乎没有分化能力；最适分化培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L，分化率及分化系数最高达96.67%及4.48；最适增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L，增值系数最高达4.93。
　　 3．以垂花百合的花瓣、子房、花托等花器官为外植体建立了再生体系。结果表明：花瓣的愈伤组织诱导率和分化率最高；诱导愈伤组织由易到难依次为花瓣>花托>子房；花瓣外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L;子房外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L;花托外植体诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L;对花瓣分化不定芽增殖效果最好的培养基为：MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L;最适生根培养基为I/2MS+IBA1.0 mg/L+NAA0.3mg/L+AC0.5g/L.
　　 4．将基部直径达0.4cm的单芽接种于附加不同浓度的活性炭及多效唑培养基中，并测定经多效唑处理后的鳞茎内源激素含量。结果表明：活性炭和多效唑浓度分别为0.5mg/L和10mg/L时，试管鳞茎增大效果最显著；多效唑处理后，内源激素GA含量先下降后缓慢上升，IAA、ABA、ZR都呈现先上升后下降的趋势，ABA和ZR含量一直低于对照；(IAA+GA)/ABA、IAA/ZR、IAA/GA比值均有不同程度升高，GA/ZR比值则有不同程度降低。其中IAA/GA比值变化幅度最大，比值在多效唑10mg/L时达到最高值27.770。