三七中主要皂苦类成分的绿色提取富集工艺研究

摘要

三七[Panax notoginseng(Burk) F．H．Chen]为五加科植物三七的块根，是一种药食同源类植物，为名贵的天然药物。研究表明，三七具有显著的药理活性，止血、活血、抗肿瘤、抗炎等。皂苷类天然产物是三七中的主要活性成分，具有广泛的生物活性，同时也是评价三七质量的重要指标。本实验采用绿色新型的提取溶剂，表面活性剂的水溶液，结合超声技术对三七中的五种主要皂苷三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd进行了提取富集，同时利用大孔吸附树脂完成了三七中的五种皂苷的分离纯化。本文成功地合成了一种新型的Gemini表面活性剂，并建立了一种高效、快速、可靠的三七中五种皂苷成分的分析检测方法，以及提取富集、分离纯化工艺，为三七资源的深度开发及高效利用提供了数据支撑。
　　本研究主要内容包括：⑴建立了HPLC同时快速检测三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd的方法。色谱柱：HIQ sil C18W column(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm)；流动相：乙腈(A)-水溶液(B)；流速：1.5 mL/min；柱温：30oC；检测波长：203 nm；进样量：5μL。梯度洗脱条件：0-20 min，21%(A)；20-45 min，21-46%(A)。⑵合成了新型表面活性剂Gemini16-5-16，具体合成条件如下：乙醇反应温度：80℃反应摩尔比： C16H33N(CH3)2: Br(CH2)5Br=2.5:1。在上述最佳合成工艺条件下，Gemini16-5-16的产率达到94.6%，并且通过红外、核磁等手段进行了化合物的确定。⑶以Triton-114/Gemini16-5-16的水溶液为提取溶剂，超声辅助提取三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1及Rd，确定了最优提取工艺参数。表面活性剂：2% Triton-114/0.03% Gemini16-5-16提取液pH： pH=8提取液固比：30:1 mL/g超声功率：250 W超声时间：40 min加盐量：20%(NH4)2SO4富集倍数：11.5倍。在上述最佳提取工艺条件下，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd五种皂苷提取率的平均值分别为28.66 mg/g、46.52 mg/g、12.91 mg/g、29.31 mg/g、9.26 mg/g;在最佳富集工艺条件下，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1和Rd五种皂苷回收率的平均值分别为86.65%、88.28%、84.94%、81.45%、89.38%，目标化合物的浓度由富集前的0.96 mg/mL、1.55 mg/mL、0.43 mg/mL、0.98 mg/mL、0.31 mg/mL，变为富集后的9.55 mg/mL、15.80 mg/mL、4.22 mg/mL、9.18 mg/mL、3.24 mg/mL。并且通过对比实验发现，复配表面活性剂的提取效率要高于常规的有机试剂，提取效率为常规有机试剂的1.13-1.52倍。⑷利用大孔吸附树脂对表面活性剂提取液中的三七五种皂苷进行分离纯化，确定了最佳工艺条件。树脂类型： AB-8上样浓度：三七皂苷R1为1.11 mg/mL、人参皂苷Rg1为1.27 mg/mL、人参皂苷Re为0.44 mg/mL、人参皂苷Rb1为0.82 mg/mL、人参皂苷Rd为0.25 mg/mL上样体积：8/3 BV上样流速：1 BV/h除杂解吸液浓度：30%乙醇除杂解吸液体积：3 BV洗脱解吸液浓度：70%乙醇洗脱解吸液体积：4.5 BV。在上述最佳条件处理下，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd含量为12.04%、16.63%、4.31%、12.35%、3.61%，分别是处理前的4.57、5.24、4.89、6.02、5.78倍。三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd回收率分别为68.53%、78.54%、73.45%、90.33%、86.64%，大孔吸附树脂分离纯化后三七皂苷产品得率为3.9%。

目录

1绪论

1.1三七简介

1.2表面活性剂简介

1.3超声辅助提取技术简介

1.4大孔吸附树脂技术简介

1.5研究的目的和意义

2三七中五种主要皂苷成分分析方法的建立

2.1实验部分

2.2结果与讨论

2.3本章小结

3 Gemini表面活性剂16-5-16的合成

3.1实验部分

3.2结果与讨论

3.3本章小结

4表面活性剂/超声辅助提取三七中皂苷成分的工艺研究

4.1实验部分

4.2结果与讨论

4.3本章小结

5大孔吸附树脂富集三七中皂苷成分的工艺研究

5.1实验部分

5.2结果与讨论

5.3本章小结

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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