Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用

摘要

目的：应用RNA干扰(RNA interference)技术，抑制小凹蛋白-1(Caveolin-1)基因的表达，观察小凹蛋白-1在骨髓间质干细胞(marrow mesenchymal stem cellsMSCs)分化为神经细胞中的作用.
　　 方法：实验分为未转染组、转染组(转染Rn-Caveolin-1-siRNA)、阳性对照组（转染Rn-MAPK-1 Control siRNA）及阴性对照组（转染Negative Control siRNA）4组。将大鼠caveolin-lsiRNA(small interfering RNA)，转染大鼠MSCs，采用β-巯基乙醇诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。MTT方法检测细胞存活率，倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况；RT-PCR检测Caveolin-1和MAPK1（促分裂原活化蛋白激酶1）mRNA的表达变化；免疫细胞化学法检测Caveolin-1、神经元烯醇化酶(NSE)、神经微丝亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。
　　 结果：
　　 1.siRNA转染72h,MSCs荧光表达最强，转染率达到（81.5±2.8）％；而且转染组MSCs的Caveolin-lmRNA转录下降(P＜0.05);MTT提示转染组细胞存活率无显著性变化(P＞0.05)。
　　 2.β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化，其中以转染组诱导效果最佳，NSE、NF-M的表达率显著的高于其它各组(P＜0.01)。
　　 3.随诱导时间延长，各组Caveolin-1表达持续增加，诱导6d达到峰值，与诱导前、诱导6h相比有显著性差异(P＜0.05)。此外，转染组与其他各组同时间点的Caveolin-1表达均显著降低(P＜0.01)。
　　 结论：Caveolin-1siRNA可以抑制Caveolin-1基因的表达，提高MSCs向神经细胞的分化效率，以上结果提示Caveolin-1有可能参与了MSCs的横向分化过程.以Caveolin-1为标记蛋白的脂筏在MSCs诱导分化为神经细胞中可能起到重要的调控作用。

目录

文摘

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缩略词表(Abbreviation)

Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用

前言

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

附表和图

综述

大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的研究

参考文献

脂筏(Lipid rafts)、细胞小凹(Caveolae)、小凹蛋白(Caveolin)的结构和生物学作用

参考文献

致谢

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